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更新時間:2017-07-10 09:12:41瀏覽次數(shù):886次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
SW 982(人滑膜肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
SD大鼠神經(jīng)干細胞 Neural stem cells in SD rat
PTH Others Human 人 PTH / PTH1 / Parathyroid Hormone 人細胞裂解液 (陽性對照)
SP20細胞,人骨肉瘤細胞 圓弧青霉 人肺成纖維細胞;HFL1
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0911
HK-2(人腎小管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 MN-c, 小鼠皮質神經(jīng)元 人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
人胰腺導管癌細胞;CFPAC-1
ERBB2 Others Mouse 小鼠 HER2 / ErbB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
CoC1(懸浮) 卵巢癌
MRC-5-EGFP+puro人胚肺成纖維細胞 MRC-5-EGFP+puro in human embryo lung fibroblasts MEM+10%Hyclone滅活血清+2ug/ml puromycin
TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標簽)
人角膜上皮細胞 (HcorF)( 5×105 ) 293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞系 Human
人表皮黑色素細胞-中色素(HEM)( 5×105 )
人前列腺癌低轉移細胞株;PC-3M-2B4
小鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs)
人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116] 大鼠腎足突細胞*培養(yǎng)基 100mL
P19 小鼠畸胎瘤細胞
MMP9 Others Mouse 小鼠 MMP-9 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠S100鈣結合蛋白A4(S100A4)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A4 ELISA Kit
人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA檢測試劑盒HumanGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 96T/48T
大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶2(Tie-2)免疫試劑盒 Rat tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA kit
英文名稱Rat15-lipoxygenaseELISAKit大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
淋巴細胞基礎培養(yǎng)液500毫升
ELISAKi人內皮脂肪酶規(guī)格:48T/96T
兔子Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Serotonin / serotonin (ST) ELISA Kit 人血清素/血清胺(ST)ELISA試劑盒
HumanPulmonarysurfatcant-associatedproteinC,SP-CELISAKit 人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanFibrinogenDegradationProduct,FDPELISA試劑盒人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量檢測試劑盒20次
HumanNoradrenalineBitartas,NE-BELISAKit人重酒石酸*(NE-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書人B細胞受體(BCR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人B細胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人B細胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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