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更新時間:2017-07-10 09:12:24瀏覽次數(shù):566次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.4)500ml售后服務(wù)
DEAE-Dextran細胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.4)500ml售后服務(wù)實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.4)500ml售后服務(wù)注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
SW 780(人膀胱移行細胞癌) 5×106cells/瓶×2
129小鼠胚胎干細胞 The 129 mouse embryonic stem cells
PROCR Others Human 人 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照)
U-2 OS細胞,人骨肉瘤細胞 黃綠青霉 人正常細胞;Hs 578Bst
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0922
HIC(人小腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標記) 人胚胎,皮膚,肌肉;M-22
家貓皮膚細胞;FCA-S1
ERBB3 Others Human 人 HER3 / ErbB3 (aa 730-1065) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0097HCT-15(人結(jié)腸癌細胞)5×106cells/瓶×2
RBE, 人肝膽管癌細胞 前列腺癌細胞,LNCaP clone FGC細胞 NCI-H661(大細胞肺癌細胞)
小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)
PLAUR Others Mouse 小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 人細胞裂解液 (陽性對照)
狗間葉干細胞(脂肪)(5×105)
人氣管上皮細胞RNAHTEpiC miRNA5 μg
小耳豬肺細胞;SEP-L2
615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS 小鼠軟骨細胞*培養(yǎng)基 100mL
細胞名稱 種屬
EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠*結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)免疫試劑盒 Human Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit
NADPH-細胞色素C還原酶(NCR)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatsubstancePreceptor,SP-RELISA試劑盒大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLactateDehydrogenase,LDHELISA試劑盒人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanNeurokininsB,NKBELISAKit人神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human serum amyloid P (SAP) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒
HumanPulmonarysurfatcant-associatedproteinB,SP-BELISAKit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanFibrinELISA試劑盒人纖維蛋白(Fibrin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織ZAP70激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
humanNoradrenaline,NAELISAKit人*(NA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.4)500ml售后服務(wù)人CCAAT增強子結(jié)合蛋白β(C/EBPβ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人CCAAT增強子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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