細胞膜染色試劑盒100T免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
細胞膜染色試劑盒100T免費代測操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞膜染色試劑盒100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
SW 1353(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

狗脂肪間質(zhì)干細胞 The dog adipose mesenchymal stem cells

TNFRSF19 Others Human 人 TNFRSF19 / TROY 人細胞裂解液 (陽性對照)

HOPC-os細胞，人少突膠質(zhì)前體細胞 構(gòu)巢曲霉 人胚腎細胞;293 [HEK-293]

人癌細胞;MDA-MB-231

HFL1(人肺成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 人張氏肝細胞;Chang liver
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1

ERBB3 Others Mouse 小鼠 HER3 / ErbB3 人細胞裂解液 (陽性對照)

Hep G2 人肝癌細胞

SW 982 [SW-982, SW982]人滑膜肉瘤細胞 SW 982 [SW-982, SW982] human synovial sarcoma cells L-15(GIBCO)+10%FBS

血管內(nèi)皮生長因子

大鼠腹部脊髓神經(jīng)元(RVSCI)(1×106) HNE2, 人鼻咽癌細胞系 Human
PGLYRP1 Others Mouse 小鼠 PGLYRP / TNFSF3L 人細胞裂解液 (陽性對照)

人氣管平滑肌細胞總RNAHTSMC tRNA

HT1080 人成纖維瘤細胞

CL-0352HFF-1(人成纖維細胞)5×106cells/瓶×2

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞

人胚肺二倍體細胞;HEL-2 人胎盤羊膜細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人糖脂抗體(glycolipid)免疫試劑盒 Human glycolipid autoantibody ELISA Kit

*-N-脫甲基酶(ERND)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣

RatStromalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISA試劑盒大鼠基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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Humanneurofilamentprotein,NFELISAKit人神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子C反應蛋白(CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human serum albumin (HSA) ELISA Kit 人血清白蛋白(HSA)ELISA試劑盒

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Humanfetalsulfoslycoproteinantigen,FSAELISA試劑盒人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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HumanN-terminalpro-brainnatriureticpeptide，NT-proBNPELISAKit人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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