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明膠水溶液(2%,無菌)100ml實驗方法

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更新時間:2017-07-10 09:10:57瀏覽次數(shù):574次

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明膠水溶液(2%,無菌)100ml實驗方法公司供應(yīng)的細胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

明膠水溶液(2%,無菌)100ml實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
明膠水溶液(2%,無菌)100ml實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
SNU-5(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2

SD大鼠脂肪間質(zhì)干細胞 SD rat adipose mesenchymal stem cells

IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人細胞裂解液 (陽性對照)

BT-325細胞,人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 空腸彎曲菌 人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1

人腦瘤細胞;SF126

Hep G2(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0442SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2 人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH3

ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 人細胞裂解液 (陽性對照)

caski

Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)小鼠肝癌細胞 Hepa1-6-EGFP (CMV-GFP lentiviral construct stable strain) of hepatocellular carcinoma cells in mice DMEM+10% FBS

TNFSF11 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

人主動脈平滑肌細胞 (HASMC)( 5×105 ) HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞 Human
ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人細胞裂解液 (陽性對照)

人氣管平滑肌細胞cDNAHTSMC cDNA

人表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基 100mL

VSMC細胞,大鼠胸主動脈平滑肌細胞 786-0(腎透明細胞腺癌) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化)

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

A2(人腺樣囊性癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠黑色素瘤細胞;B16
大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)免疫試劑盒 Human SP1/PSβ1-G ELISA Kit

MouseKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

IL-1alpha(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克

HumanNetrin-1,Ntn1ELISA試劑盒人軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanproteinphosphatase1regulatorysubunitA,PPP1R1AELISAKit人蛋白磷酸酶1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human heme oxygenase 2 (HO-2) ELISA Kit 人血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒

Humangranulocytespecificantinuclearantibody,GS-ANAELISAKit 人粒細胞特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanfattyacid-bindingprotein,FABPELISA試劑盒人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織VZV(VARICELLAZOSTER)病毒定性檢測試劑盒20

HumanNuclearmatrixprotein22,NMP-22ELISAKit人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
明膠水溶液(2%,無菌)100ml實驗方法EB病毒IgA(EBvIgA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

D-乳酸(D-LACELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

D二聚體(D2D)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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