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更新時間:2017-07-10 09:10:08瀏覽次數(shù):313次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
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DEAE-Dextran細胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書
細胞凍存用DMSO(無菌)100ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞凍存用DMSO(無菌)100ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞凍存用DMSO(無菌)100ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
F344大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解液 (陽性對照)
U373細胞,人腦膠質(zhì)瘤細胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無色素睫狀上皮細胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg
人癌細胞;SK-BR-3
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21
Ishikawa, 人子宮內(nèi)膜癌細胞系
ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腦動脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞 RF/6A monkey chorioretinal cells (endothelial) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IFNA7 Protein Human 重組人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MDA-MB-436(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 L929(成纖維細胞)
IFNW1 Others Human 人 IFN omega 1 / IFNW1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人臍靜脈內(nèi)皮細胞RNAHUVEC miRNA5 μg
人腎足突細胞*培養(yǎng)基 100mL
PC12細胞,大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞 Hep G2(肝癌細胞) 人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]
IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77)
SPC-A-1(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠顆粒酶K(GZMK)ELISA試劑盒 ,英文名: GZMK ELISA Kit
人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)ELISA檢測試劑盒HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 96T/48T
大鼠血清素受體2A/5-羥色胺受體2A(5-HT-2A)免疫試劑盒 Rat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxytryptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit
英文名稱RatadiponectinELISAKit大鼠脂聯(lián)素(adiponectin)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
高多糖/酚植物線粒體DNA萃取試劑盒10/20次
ELISAKitf-Hb人游離血紅蛋白規(guī)格:48T/96T
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