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更新時間:2017-07-10 09:08:09瀏覽次數(shù):177次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
DEAE-Dextran細胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書
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明膠水溶液(1%)100ml售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
明膠水溶液(1%)100ml售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
SF763(人腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells
IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照)
SK-N-MC細胞,人神經(jīng)上皮瘤細胞 蠟樣芽孢桿菌 人腎小球內(nèi)皮細胞RNAHRGEC miRNA5 μg
急性T淋巴細胞白血病細胞;TALL-104
HCT 116(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0401NCI-H446(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-
豬腎細胞;LLC-PK1
ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0149MCF-7(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
NIH/3T3細胞,鼠成纖維細胞系 人Burkitts淋巴瘤細胞系,CA46細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1
Anglne(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CXCL12 Others Human 人 CXCL12 / SDF1b 人細胞裂解液 (陽性對照)
PSG6 Others Human 人 PSG6 / PSG10 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC
CL-0302PA319(人大腸癌細胞)5×106cells/瓶×2
GC-1, 鼠精原細胞 swiss鼠胚胎成纖維細胞,3T3 swiss細胞 NCL-H548(人胰腺癌細胞)
人胃癌細胞;MKN-45
CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠瘦素(LEP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人天門冬氨酰-tRNA合成酶(DARS)免疫試劑盒 Human Aspartyl-tRNA synthetase, cytoplasmic,DARS ELISA kit
基比林-N-去甲基化酶(AND)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatStemCellFactorReceptor,SCFRELISA試劑盒大鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanKeratinocyteGrowthFactor,KGFELISA試劑盒人角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanneuraminidase,NAELISAKit人神經(jīng)氨酸酶(NA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human bradykinin (BK) ELISA Kit 人血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒
HumanInterferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit 人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanexcisionrepaircross-complementationgroup1,ERCC1ELISA試劑盒人切除修復交叉互補基因1(ERCC1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanOncostatin-M,OSMELISAKit人抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
明膠水溶液(1%)100ml售后服務人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人preptinELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人PL7抗體/抗蘇酰tRNA合成酶(PL7)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人PL12抗體/抗丙酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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