Earle's*(1×EBSS,無(wú)鈣鎂糖酚紅)500ml實(shí)驗(yàn)方法SF17(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

狗骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells

CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

U87MG細(xì)胞，人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 雜色曲霉 人氣管上皮細(xì)胞RNAHTEpiC miRNA5 μg

人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H520

HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0393NCI-H209(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO

Earle's*(1×EBSS,無(wú)鈣鎂糖酚紅)500ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Earle's*(1×EBSS,無(wú)鈣鎂糖酚紅)500ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Earle's*(1×EBSS,無(wú)鈣鎂糖酚紅)500ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
人絨毛間葉成纖維細(xì)胞總RNAHVMF tRNA

EREG Others Human 人 Epiregulin / EREG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Eca-109 人食管癌細(xì)胞

CL-0393NCI-H209(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC 人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
F9 Others Human 人 F9 / FIX / Factor IX 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC

NCI-H520 肺鱗癌

正常細(xì)胞

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)

人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子12(FGF12)ELISA試劑盒 ，英文名： FGF12 ELISA Kit

人天青殺素(AZU)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanazurocidin,AZUELISAKit 96T/48T

大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)免疫試劑盒 Rat Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K ELISA Kit

英文名稱RatTestoteroneELISAKit大鼠睪同(Testoterone)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

酵母細(xì)胞周期G1期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

ELISAKitDAF/CD55人衰變加速因子規(guī)格：48T/96T
兔子白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 人血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒

HumanpodocinELISAKit 人PodocinELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanEukaryotictranslationinitiationfactor3a,eIF3aELISA試劑盒人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織TAK1-TAB1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

HumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Earle's*(1×EBSS,無(wú)鈣鎂糖酚紅)500ml實(shí)驗(yàn)方法人Qa淋巴細(xì)胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝