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更新時間:2017-07-10 09:07:38瀏覽次數(shù):203次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖)500ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖)500ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖)500ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
SF126(人腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
兔骨髓間質干細胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細胞裂解液 (陽性對照)
SF-295細胞,人XG惡性膠質瘤細胞 毛霉 人腸平滑肌細胞RNAHISMC miRNA5 μg
人胰腺癌細胞;AsPC-1
HCC827(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞;CV-1
人滑膜細胞總RNAHS tRNA
EREG Others Mouse 小鼠 EREG / epiregulin 人細胞裂解液 (陽性對照)
MDA-MB-231 人癌細胞
CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2
CSC, 小鼠心肌細胞
人胚肺二倍體細胞;HEL-1 人胃粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人肺微血管內皮細胞 (HPMEC)( 5×105 )
人臍靜脈內皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]
CL-0341H22(小鼠肝癌細胞)5×106cells/瓶×2
人髓母細胞瘤細胞;Daoy 大鼠成骨細胞*培養(yǎng)基 100mL
FO 小鼠骨髓瘤細胞
SERPINA12 Others Human 人 Vaspin / SerpinA12 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠鼠狂犬病毒(RV/PRV-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人天青殺素/肝素結合蛋白(AZU/HBP)免疫試劑盒 Human Azurocidin/Heparin Binding Protein,AZU/HBP ELISA Kit
β-木糖苷酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatSomatostatin,SSELISA試劑盒大鼠*(SS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humankeratinocyteautocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA試劑盒人角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanNeural-Cadherin,N-CadELISAKit人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子白介素1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human angiopoietin receptor Tie1 (ANG-R-Tie1) ELISA Kit 人血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒
HumanNephrinELISAKit 人蛋白(nephrin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanEuglobulinLysis,ELELISA試劑盒人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織S腺苷同型半*核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次
HumanOrexinAELISAKit人阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖)500ml免費代測人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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