Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖)500ml免費(fèi)代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖)500ml免費(fèi)代測操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖)500ml免費(fèi)代測實(shí)驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
SF126(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

兔骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells

CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

SF-295細(xì)胞，人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞 毛霉 人腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μg

人胰腺癌細(xì)胞;AsPC-1

HCC827(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1
人滑膜細(xì)胞總RNAHS tRNA

EREG Others Mouse 小鼠 EREG / epiregulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MDA-MB-231 人癌細(xì)胞

CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CSC, 小鼠心肌細(xì)胞

人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-1 人胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HPMEC)( 5×105 )

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(人膀胱癌細(xì)胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]

CL-0341H22(小鼠肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Daoy 大鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

FO 小鼠骨髓瘤細(xì)胞

SERPINA12 Others Human 人 Vaspin / SerpinA12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠鼠狂犬病毒(RV/PRV-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人天青殺素/肝素結(jié)合蛋白(AZU/HBP)免疫試劑盒 Human Azurocidin/Heparin Binding Protein,AZU/HBP ELISA Kit

β-木糖苷酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣

RatSomatostatin,SSELISA試劑盒大鼠*(SS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humankeratinocyteautocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA試劑盒人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanNeural-Cadherin,N-CadELISAKit人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子白介素1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human angiopoietin receptor Tie1 (ANG-R-Tie1) ELISA Kit 人血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒

HumanNephrinELISAKit 人蛋白(nephrin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanEuglobulinLysis,ELELISA試劑盒人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織S腺苷同型半*核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次

HumanOrexinAELISAKit人阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖)500ml免費(fèi)代測人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝