Earle's*(1×EBSS,含鈣鎂糖酚紅)500ml使用說(shuō)明書(shū)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Earle's*(1×EBSS,含鈣鎂糖酚紅)500ml使用說(shuō)明書(shū)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Earle's*(1×EBSS,含鈣鎂糖酚紅)500ml使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

胎兒骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Fetal bone marrow mesenchymal stem cells

CD164 Others Rat 大鼠 CD164 / Endolyn 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

SHG-44細(xì)胞，神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 霉 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞RNAHLEC miRNA5 μg

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;MuM-2B

HCC1937(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2

ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs) 人肝癌細(xì)胞，Hep G2細(xì)胞 C127(細(xì)胞)

人癌細(xì)胞;MDA-MB-157

BMPR1A Others Mouse 小鼠 ALK-3 / BMPR1A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
MFAP5 Others Human 人 MFAP5 / MAGP2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總RNAHUASMC tRNA

人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

PA317細(xì)胞，逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細(xì)胞 A10(大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞) 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14

CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TE-1(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠原B細(xì)胞株;BaF3
小鼠α-骨膠原交聯(lián)(αCTx)ELISA試劑盒 ，英文名： αCTx ELISA Kit

人鐵蛋白(FE)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanferritin,FEELISAKit 96T/48T

大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒 Rat Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit

英文名稱RatCXCL2/MIP-2ELISAKit大鼠CXCL2/MIP-2規(guī)格：96T/48T

考馬斯亮藍(lán)細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑盒500次

ELISAKitGKRP人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白規(guī)格：48T/96T
兔子白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 人血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒

HumanSolubleClusterofdifferentiation38,sCD38ELISAKit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原38(sCD38)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanEstrogen-inducedproteinpS2ELISA試劑盒人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織SYK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

HumanOrexinB,OX-BELISAKit人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Earle's*(1×EBSS,含鈣鎂糖酚紅)500ml使用說(shuō)明書(shū)人TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人TATA盒結(jié)合蛋白/TBP相關(guān)因子(TAF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人S蛋白100P（S-100P）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝