當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞培養(yǎng)>> D-Hanks' *,不含酚紅500ml實驗方法
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
D-Hanks' *,不含酚紅500ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
D-Hanks' *,不含酚紅500ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
D-Hanks' *,不含酚紅500ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
RM1(大鼠肌肉成纖維樣細胞) 5×106cells/瓶×2
SK-N-BE(2)人神經母細胞瘤細胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS
CD300LG Others Human 人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 人細胞裂解液 (陽性對照)
TG-905細胞,人腦膠質母細胞瘤細胞 熒光假單胞菌 人滋養(yǎng)層絨毛細胞總RNAHVT tRNA
小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞;DCS
H4(人腦神經膠質瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0328CEM/C1(人急性淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2 小耳豬肺細胞;SEP-L1
前脂肪細胞分化培養(yǎng)基PADM
EVI2A Others Human 人 EVI2A 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA
大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1 結腸腺癌細胞,LS 174T細胞 RPC細胞,大鼠垂體細胞
CNE1, 人鼻咽癌細胞系 Human
CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD24 Others Mouse 小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 人細胞裂解液 (陽性對照)
人臍動脈內皮細胞裂解物HUAECL
人腦動脈血管內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
COS-1細胞,非洲綠猴腎細胞 T-24(膀胱變移細胞癌) 中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF
EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
BC-020(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠子細胞;U14
小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)ELISA試劑盒 ,英文名: PPARγ ELISA Kit
人通用轉錄復合體(GTC)ELISA檢測試劑盒Humangeneraltranscriptioncomplex,GTCELISAKit 96T/48T
大鼠糖原合成酶激酶(GSK)免疫試劑盒 Rat glycogen synthase kinase,GSK ELISA Kit
英文名稱RatAquaporin4ELISAKit大鼠水通道蛋白4(AQP4)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
化妝品環(huán)氨酸(cyclamate)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitATⅡR1人血管緊張素Ⅱ受體1抗體規(guī)格:48T/96T
兔子表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 人血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒
HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit 人內臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanEstradiol,E2ELISA試劑盒人雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織SPHK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit人孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-Hanks' *,不含酚紅500ml實驗方法人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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