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更新時間:2017-07-07 13:11:15瀏覽次數(shù):124次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.4)500ml售后服務(wù)
DEAE-Dextran細胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書
*溶液(1%)100ml售后服務(wù)實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
*溶液(1%)100ml售后服務(wù)注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
RKO-AS45-1(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞) 5×106cells/瓶×2
KP-N-NS人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移) KP-N-NS human adrenal neuroblastoma cells (brain metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IZUMO1 Others Human 人 IZUMO1 人細胞裂解液 (陽性對照)
SF763細胞,人腦瘤細胞 肺炎克雷伯菌 人顱骨造骨細胞總RNAHCO tRNA
轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1
FRhK-4(恒河猴胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0307SW1116(人結(jié)腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 大耳山羊腎細胞;LDG-2
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S1
F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細胞裂解液 (陽性對照)
人支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
D407細胞,人視網(wǎng)膜色素上皮細胞 出芽短梗霉 人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572)
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 標簽)
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2 小鼠 AMICA1 / JAML 人細胞裂解液 (陽性對照)
CTF1 Others Human 人 Cardiotrophin-1 / CTF1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人臍動脈內(nèi)皮細胞
人心肌細胞RNAHCM miRNA5 μg
兔角膜后基質(zhì)層成纖維細胞;RCBBF 肺癌細胞,A549[A-549]細胞 145-2C11細胞,倉鼠/小鼠雜交瘤細胞
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞;HK-2
HA Others H10N3 甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人同源框A3(HOXA3)免疫試劑盒 Human Homeobox A3,HOXA3 ELISA kit
α-葡萄糖苷酶(α - GC)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatSolubleprotein-100B,S-100BELISA試劑盒大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanJo-1Antibody,Jo1/HRSELISA試劑盒人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒
Humananti-gangliosideantibody,GM1ELISAKit 人抗*抗體(GM1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanErythropoietin,EPOELISA試劑盒人紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織RSK3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanOsteogenicGrowthPeptide,OGPELISAKit人成骨生長肽(OGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
*溶液(1%)100ml售后服務(wù)人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β2整合素(integrinβ2/CD11+CD18)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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