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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞培養(yǎng)>> *-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說(shuō)明書(shū)

*-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2017-07-07 13:09:41瀏覽次數(shù):252次

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公司供應(yīng)的*-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說(shuō)明書(shū)品種類齊全,檢測(cè)效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

*-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說(shuō)明書(shū)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
*-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說(shuō)明書(shū)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
*-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

U-2 OS人骨肉瘤細(xì)胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS McCoy's 5A+10%FBS

TNFRSF18 Others Rat 大鼠 GITR / TNFRSF18 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Ealy926細(xì)胞,人腸系膜下腔動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 白色假絲酵母/白色念球菌 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHPAEC tRNA

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

F81(貓腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0281HELF(人胚肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)

F3 Others Human Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

22RV1 人前列腺癌細(xì)胞

MDCK-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)狗腎上皮細(xì)胞 MDCK-EGFP-puro (lentiviral construct stable strains of canine renal epithelial cells) EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin

PDGFC Protein Human 重組人 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人肺泡上皮細(xì)胞 (HPAEpiC)( 1×106 ) rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞 Rattus
TH Others Human TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞cDNAHUMSC cDNA

大鼠雪旺細(xì)胞;RSC96

LTEP-a-2細(xì)胞,肺腺癌細(xì)胞 人喉表皮樣癌細(xì)胞,HEp-2細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B);Pan02-CAG-tTA-4C5

雜交瘤(B);Z1510A2G6A2F8

INSR Others Human Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Short Isoform ) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人銅鋅-過(guò)氧化物岐化酶(SOD1)免疫試劑盒 Human Superoxide dismutase [Cu-Zn] (SOD1) ELISA kit

纖維素酶(CL)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50/24

Ratsolubleplaetendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISA試劑盒大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanisocitratedehydrogenase,ICDELISA試劑盒人異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humannasopharyngealcarcinoma,NPCELISAKit人鼻咽癌(NPC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human vascular endothelial cadherin complex (VE-cad) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒

Humananti-neutrophilantibody,ANAELISAKit 人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanerythrocytemembraneprotein,EMPELISA試劑盒人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織RSE激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20

HumanOsteoprotegerin,OPGELISAKit人骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
*-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說(shuō)明書(shū)人β(β-OHB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人β酚(β-naphthol)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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