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更新時間:2017-07-05 11:30:43瀏覽次數(shù):145次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
真菌蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)楝 Melia azedarach L. Toosendanin 苦楝素 58812-37-6 C30H38O11 ≥98%
葉皇制菌速Xcnthctin6791-73-120mg
沒食子酸乙酯;3,4,5-三輕基本乙酯 etxyl gallate 831-61-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*鈉130549-200501紅外鑒別
6'''-阿魏酰斯皮諾素 6'''-Feruloylspinosin 77690-92-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
產(chǎn)品名稱:真菌蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)
儲存條件:蛋白酶抑制劑、穩(wěn)定劑-20℃保存;
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
真菌蛋白提取試劑盒適用于從各種除大型真菌(蕈菌)類以外的其他真菌類樣本中提取總蛋白。包括各種絲狀真菌(霉菌)、酵母樣本。試劑盒組分針對真菌厚細(xì)胞壁樣本進(jìn)行優(yōu)化,提取過程簡單方便,可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。
真菌蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
真菌蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
真菌蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
3,6-二芥子?;崽?/span>(暫行) 3,6- twomustardacylsucrose(Provisional) 20mg
鵝不食草隊(duì)照藥材Centipedacontrolmedicine1g
Odorine ODORINE 72755-20-5
1-Butanol正丁醇標(biāo)準(zhǔn)品71-36-31.2ml×3ampules正丁醇標(biāo)準(zhǔn)品
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Taraxerol 蒲公英萜醇 127-22-0
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