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絲狀真菌蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說(shuō)明書

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更新時(shí)間:2017-07-05 11:28:11瀏覽次數(shù):89次

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絲狀真菌蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說(shuō)明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
絲狀真菌蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說(shuō)明書儲(chǔ)存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;蛋白提取液室溫保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

絲狀真菌蛋白提取試劑盒(二維電泳用)適用于從各種絲狀真菌中提取總蛋白。優(yōu)化的裂解液配方可以充分釋放各種有隔膜菌絲和無(wú)隔膜菌絲蛋白以及各種菌絲體蛋白,提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。

該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。提取的蛋白用于二維電泳。

絲狀真菌蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
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木紫珠Callicarpa arborea Antiarol rutinoside 3,4,5-*氧基本酚蘆丁糖甙 261351-23-9 C21H32O13 95%
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大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人糖化白蛋白(GA)免疫試劑盒 Human Glycated Albumin,GA ELISA Kit

土壤β-葡萄糖苷酶(β - GC)測(cè)試盒 可見分光光度法 50/24

Ratthymusactivationregulatedchemokine,TARCELISA試劑盒大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanLeptospiraIgG,LepIgGELISA試劑盒人鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humannon-neuronalenolase,NNEELISAKit人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔血管緊張素Ⅱ(ANG-)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human plaet glycoprotein B III (b III a/CD41+CD61 a GP- II) ELISA Kit 人血小板膜糖蛋白Ⅱba(GP-ba/CD41+CD61)ELISA試劑盒

Humanepstein-barrvirusIgM,EBvIgMELISAKit EB病毒IgM(EBvIgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanfrizzledhomolog8,FZD8ELISA試劑盒人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織半*蛋白酶-5(PASE-5)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

HumanNetrin-1,Ntn1ELISAKit人軸突生長(zhǎng)誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
絲狀真菌蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說(shuō)明書5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

禽白血病J亞型(ALV-JELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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