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更新時間:2017-07-05 11:24:35瀏覽次數(shù):99次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)絲狀真菌蛋白提取試劑盒50T免費代測儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
絲狀真菌蛋白提取試劑盒適用于從各種絲狀真菌中提取總蛋白。優(yōu)化的裂解液配方可以充分釋放各種有隔膜菌絲和無隔膜菌絲蛋白以及各種菌絲體蛋白,提取過程簡單方便,可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
本試劑盒提取的蛋白不可用于2D電泳。
絲狀真菌蛋白提取試劑盒50T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
絲狀真菌蛋白提取試劑盒50T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
臭常山Orixa japonica Thunberginol C 3,4-二氫-6,8-二羥基-3-(4-羥基本基)-1H-2-本并-1-酮 147517-06-4 C15H12O5 ≥97%
鹽醋葫蘆巴減Trigonqllinqxy7nochloridq6138-41-620mg
芒柄花苷;刺芒柄花苷,刺芒柄花素-7-葡萄糖苷 Ononin 486-62-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品鹽酸左氧扶沙星130537-200301僅供紅外鑒別
1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖 1
2-安基-4-錄本酚 2-amino -4- chloropxenol 95-85-2 50mg
鉤吻減GouWenjian209-12-920mg
Coronarin D 姜花素D 119188-37-3
Tiagabine xy7nochloride鹽酸噻加賓標準品145821-59-6 300mg鹽酸噻加賓標準品
尼泊金丁;Butylparaben 94-26-8 20mg 訂購|咨詢
* Tranilast 53902-12-8 100mg
氧基白屈菜紅減Ethoxychelerythrine12743-19-610mg
NeotuberosteMonine 新對葉百部減 143120-46-1
*E異構(gòu)體溶液標準品67-56-1 0.5ml*E異構(gòu)體溶液標準品
木香烴內(nèi)酯;costunolide 553-21-9 20mg 訂購|咨詢
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