植物蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)

1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
產(chǎn)品名稱：植物蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）50T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存；蛋白提取液、蛋白穩(wěn)定劑2-8℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒提供全套試劑，適用于從各種植物細(xì)胞、組織樣本中提取總蛋白。提取過程簡(jiǎn)單方便。本試劑盒提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等蛋白研究。本試劑盒提取的蛋白不可用于2D電泳。

植物蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
植物蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
鳳仙花Impetiens balsamina Tetraxy7noxysqualene 四羥基鯊稀 1043629-23-7 C30H50O4 ≥95%

酰蝙蝠葛蘇林減ccqtylbctGqSulinjicn20mg

麥冬皂苷B;麥冬皂甙B Ophiopogonin B 38971-41-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

含量測(cè)定異甘草酸100879-200801常溫，避光100mg

蘆西定 478-08-0 Lucidin 478-08-0 20mg HPLC≥98% 蘆西定用于含量測(cè)定
29122-74-5 美托洛爾相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

肉桂Cinnamomum cassia 桂二萜醇 62394-04-1 C20H32O7 ≥98% 伊拉地平 雜質(zhì)D(Y0000 67

扶啶脲標(biāo)準(zhǔn)品 扶磺安草迷標(biāo)準(zhǔn)品 扶節(jié)安標(biāo)準(zhǔn)品

*相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品137863-20-8 10mg

羽扇豆醇 545-47-1 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
貝母素甲 Peimine 分 子 量：431.6500 編號(hào)：23496-41-5 分子式：C27H45NO3 別　　名：浙貝甲素;貝母甲素 【性狀】為針狀結(jié)晶。熔點(diǎn)223～224℃，旋光度[α]D16-19.4°(乙醇);旋光度[α]D17-20°(錄仿)。不溶于水、石油醚，溶于大多數(shù)有機(jī)溶媒。

野甘草Scoparia dulcis Scoparinol 野甘草屬醇 130838-00-5 C27H38O4 *(100041

含量測(cè)定*100173-201002常溫，避光100mg

甘羅溴銨相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品25mg

積雪草 Cenla asiatica (L.) Urban Madecassic acid 羥基積雪草酸 18449-41-7 C30H48O6 ≥98%
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