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更新時(shí)間:2017-07-05 11:18:00瀏覽次數(shù):249次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
我司HRP酶穩(wěn)定劑50g免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
HRP酶穩(wěn)定劑50g免費(fèi)代測儲(chǔ)存條件:室溫保存
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
辣根過氧化物酶(Horseradishperoxidase,HRP)是應(yīng)用廣泛的一種標(biāo)記物,但其在低濃度下不穩(wěn)定,極易失活。HRP酶穩(wěn)定劑對(duì)HRP酶標(biāo)試劑有強(qiáng)大的保護(hù)作用,使稀釋的HRP酶標(biāo)試劑在極低濃度下室溫保存穩(wěn)定12個(gè)月以上。該試劑與低濃度BSA(1-2mg/ml)協(xié)同作用,保護(hù)作用更強(qiáng)。加入HRP穩(wěn)定劑的酶在47℃存放3天后,酶的相對(duì)活力為90%。在室溫*存放3個(gè)月以后,酶的相對(duì)活力為59%。
HRP酶穩(wěn)定劑50g免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
HRP酶穩(wěn)定劑50g免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
益智Alpinia oxyphylla Tetraxy7nocurcumin 1,7-雙(4-羥基-3-甲氧基本基)庚烷-3,5-二酮 36062-04-1 C21H24O6 ≥98%
異*Isosilybin7281-71-610mg
馬兜鈴內(nèi)酰安 Aristololactam 13395-02-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定酸肌酸鈉100875-200901常溫,避光100mg
雷酚內(nèi)酯;山海棠素 Triptopxenolide 74285-86-2 20mg
29110-48-3 *標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
湖貝速Hupehenine9843-27-310mg
PandaMarilactonine A PANDAMARILACTONINE A 303008-80-2
Cimetidine*標(biāo)準(zhǔn)品51481-61-9200mg*標(biāo)準(zhǔn)品
大豆異黃酮 ;Isoflavone 574-12-9 20mg 訂購|咨詢
119302-91-9 *標(biāo)準(zhǔn)品 250mg
野皇芩速ScularinHPLC≥98%,20mg/支
Resorcinol 間本二酚 108-46-3
Temazepam CIV標(biāo)準(zhǔn)品846-50-4 200mg標(biāo)準(zhǔn)品
鹽酸*;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 86393-32-0 0.1g 訂購|咨詢
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