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更新時間:2017-07-05 11:17:09瀏覽次數(shù):358次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)產(chǎn)品名稱:蛋白印跡膜再生液( Stripping Buffer)500ml實驗方法
儲存條件:室溫保存
有效期:一年
產(chǎn)品簡介:
使用本產(chǎn)品可以對同一張膜進(jìn)行多次WesternBlot檢測。在室溫條件下,將用過的膜浸泡在抗體去除液中30-60分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪WesternBlot實驗,因而可利用同一張膜進(jìn)行多次蛋白檢測。
蛋白印跡膜再生液( Stripping Buffer)500ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
蛋白印跡膜再生液( Stripping Buffer)500ml實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白印跡膜再生液( Stripping Buffer)500ml實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
黃柏 Phellodendron amucrense Rupr Tetraxy7noberberine 四氫小檗堿 522-97-4 C20H21NO4 ≥98%
野菊花內(nèi)酯NoKikukclcctonq20mg
落新婦苷;花旗松素-3-O-α-L-鼠李糖苷 Astilbin 29838-67-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*130520-200501含量測定
靈芝酸G Ganoderic acid G 98665-22-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
28910-89-6 啊普坐輪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg
潺槁木姜子Litsea glutinosa 短葉老鶴草素 A 16503-32-5 C20H26O5 ≥90% 培扶沙星 雜質(zhì)C(P0 090 0
呋草黃標(biāo)準(zhǔn)品 呋草同標(biāo)準(zhǔn)品 豐索靈標(biāo)準(zhǔn)品
*雜質(zhì)混合物標(biāo)準(zhǔn)品ea*雜質(zhì)混合物標(biāo)準(zhǔn)品
長春質(zhì)堿 70674-90-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
茵陳(濱蒿) Yin Chen(Artemisia scoparia) 1.5g
野菊花隊照藥材NoKikukacontrolmedicine1g
Tanshinone I 丹參同 I 568-73-0
安格洛苷C安格洛甙C115909-22-3Angoroside C
*;Ligustr H 76494-51-4 20mg 訂購|咨詢
小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A4 ELISA Kit
人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA檢測試劑盒HumanGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 96T/48T
大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶2(Tie-2)免疫試劑盒 Rat tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA kit
英文名稱Rat15-lipoxygenaseELISAKit大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
淋巴細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)液500毫升
ELISAKi人內(nèi)皮脂肪酶規(guī)格:48T/96T
兔子Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Serotonin / serotonin (ST) ELISA Kit 人血清素/血清胺(ST)ELISA試劑盒
HumanPulmonarysurfatcant-associatedproteinC,SP-CELISAKit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanFibrinogenDegradationProduct,FDPELISA試劑盒人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量檢測試劑盒20次
HumanNoradrenalineBitartas,NE-BELISAKit人重酒石酸*(NE-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白印跡膜再生液( Stripping Buffer)500ml實驗方法人B細(xì)胞受體(BCR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人B細(xì)胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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