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更新時間:2017-07-05 11:12:49瀏覽次數(shù):164次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)尿蛋白防腐劑1ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:尿蛋白防腐劑1ml售后服務(wù)
儲存條件:室溫保存。
有效期:一年。
使用方法:每100ml尿液中加1ml防腐劑混勻即可。
尿蛋白防腐劑1ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
尿蛋白防腐劑1ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
通光散Marsdenia tenacissima Tenacissoside F *苷 F 928151-78-4 C35H56O12 ≥95%
鹽醋伊立替康Irinotqccnxy7nochloridq10086-90-620mg
錄化兩面針減 Nitidine chloride 13063-04-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定鹽酸*100866-200701常溫,避光100mg
二氫青蒿酸;雙氫青蒿酸 Dixy7noartemisinic acid 20mg
27387-31-1 *有關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 30mg
金錢松Pseudolarix kaempferi 去乙?;灵?/span> 82508-37-0 C20H26O5 ≥98.5% SECO-ISOLARICIRESINOL(SECO(P19102
L-Fucose (AS)L-巖藻糖標(biāo)準(zhǔn)品2438-80-4 200mg
Temazepam CIV標(biāo)準(zhǔn)品846-50-4 200mg
絡(luò)塞定 100462-37-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
川陳皮素 Nobiletin (≥98%,HPLC) 478-01-3 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
野扇花Sarcococca ruscifolia 8ALPHA-輕基-ALPHA-古蕓烯 70206-70-1 C15H24O ≥97% 常春藤葉標(biāo)準(zhǔn)酊劑(Y0000575
Pinoresinol diglucoside松脂醇二葡萄糖苷63902-38-5松酯醇二葡萄糖苷20mg/支
*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品127780-16-9 25mg
姜黃 Curcuma longa L. Curcumin 姜黃素 458-37-7 C21H20O6 ≥98%
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