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更新時間:2017-07-05 11:10:32瀏覽次數(shù):184次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網增強型ECL化學發(fā)光檢測試劑盒100ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產品名稱:增強型ECL化學發(fā)光檢測試劑盒100ml免費代測
儲存條件:2-8℃避光保存。
有效期:一年
產品簡介:
免疫印跡重要也是后一步就是酶與底物反應進行檢測,本試劑盒以化學熒光發(fā)光方法檢測蛋白質或核酸類生物大分子。其原理是,蛋白質或核酸在電泳后轉移到印跡膜上,以一抗及辣根過氧化物酶HRP標記的二抗結合膜上的目的蛋白,或以HRP標記的探針直接或間接結合膜上的核酸。洗膜后用本產品配制的ECL工作液,在可見光下室溫孵育膜數(shù)分鐘,將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。然后轉入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數(shù)秒到數(shù)分鐘至數(shù)小時。
增強型ECL化學發(fā)光檢測試劑盒100ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
增強型ECL化學發(fā)光檢測試劑盒100ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
千金藤Stephania japonica Taxiphyllin 紫杉清醣甘 21401-21-8 C14H17NO7 ≥98.5%
延胡索速CorydclisTriptolidq218-69-420mg
蘆薈大黃素;蘆薈瀉素 Aloeemodin 481-72-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定*100862-200701常溫,避光100mg
吳茱萸苷,野續(xù)斷苷III Cantleyoside 20mg HPLC≥98% 吳茱萸苷用于含量測定
2668-66-8 甲羥松標準品 500mg
各石苷Tracheloside20mg
IsotschiMgin REL-4-輕基本 (1R,2R,4R)-1,7,7-*基雙環(huán)[2.2.1]庚-2-基酯 62356-47-2
甜菜安 標準品 號:13684-56-5 250MG
附子靈;Fuziline 20mg 訂購|咨詢
蘿藦科牛奶菜屬植物* Marsdeniatenacissima(Roxb.)WightetArn. Tenacissoside I *苷I 191729-44-9 C44H62O14 ≥98%
葉皇速Xcnthophyll17-40-20mg
羅漢果皂苷V;羅漢果皂苷V;羅漢果甜苷V Mogroside Ⅴ 88901-36-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品地*130516-200401含量測定
新苦參醇 Neokurarinol 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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