產(chǎn)品名稱：增強型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒50ml使用說明書
儲存條件：2-8℃避光保存。

有效期：一年

產(chǎn)品簡介：

免疫印跡重要也是后一步就是酶與底物反應(yīng)進行檢測，本試劑盒以化學(xué)熒光發(fā)光方法檢測蛋白質(zhì)或核酸類生物大分子。其原理是，蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上，以一抗及辣根過氧化物酶HRP標記的二抗結(jié)合膜上的目的蛋白，或以HRP標記的探針直接或間接結(jié)合膜上的核酸。洗膜后用本產(chǎn)品配制的ECL工作液，在可見光下室溫孵育膜數(shù)分鐘，將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。然后轉(zhuǎn)入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數(shù)秒到數(shù)分鐘至數(shù)小時。

增強型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒50ml使用說明書使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
增強型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒50ml使用說明書操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
增強型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒50ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
云南紅豆杉Taxus yunnanensis Taxinine B 紫杉素 B 18457-44-8 C37H44O11 ≥95%

異橙皇同ISOsinqnsqtin20mg

蘆丁;蕓香苷;蕓香葉苷;維生素P;蘆丁蕓香苷;蕓香甙 Rutin 153-18-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品鹽酸*130509-200301含量測定

楤木皂苷A Cantleyoside 7518-22-1 20mg/支 HPLC≥98% 楤木皂苷A用于含量測定
26675-46-7 異扶烷標準品(特殊運輸) 1ml

當藥寧Swertianolin088-72-120mg

22-xy7noxy-3-oxo-12-ursen-30-oic acid (22ALPHA)-22-輕基-3-氧代烏蘇-12-烯-30-酸 173991-81-6

Vecuronium Bromide *標準品50700-72-6 50mg*標準品

次大風(fēng)子素;Hydnocarpin 51419-48-8 10mg 訂購|咨詢
楝 Melia azedarach L. Toosendanin 苦楝素 58812-37-6 C30H38O11 ≥98%

葉皇制菌速Xcnthctin6791-73-120mg

沒食子酸乙酯;3,4,5-三輕基本乙酯 etxyl gallate 831-61-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*鈉130549-200501紅外鑒別

6'''-阿魏酰斯皮諾素 6'''-Feruloylspinosin 77690-92-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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