ECL化學發(fā)光檢測試劑盒100ml實驗方法儲存條件：2-8℃避光保存。*存放-20℃避光。

有效期：一年

產(chǎn)品簡介：

免疫印跡重要也是后一步就是酶與底物反應進行檢測，本試劑盒以化學熒光發(fā)光方法檢測蛋白質(zhì)或核酸類生物大分子。其原理是，蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上，以一抗及辣根過氧化物酶HRP標記的二抗結(jié)合膜上的目的蛋白，或以HRP標記的探針直接或間接結(jié)合膜上的核酸。洗膜后用本產(chǎn)品配制的ECL工作液，在可見光下室溫孵育膜數(shù)分鐘，將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。然后轉(zhuǎn)入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數(shù)秒到數(shù)分鐘至數(shù)小時。

ECL化學發(fā)光檢測試劑盒100ml實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
ECL化學發(fā)光檢測試劑盒100ml實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
云南紅豆杉Taxus yunnanensis Taxayunnansin A 云南紅豆杉酯甲 153229-31-3 C35H44O13 ≥95%

8-氧皇連減8-oxygqnHucngLicnjicn20mg

龍膽苦苷;龍膽苦甙 Gentiopicroside 20831-76-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*130508-200301含量測定

水飛薊亭 Silychristin 33889-69-9 20mg/支 HPLC≥98% 用于含量測定
26538-44-3 玉米赤霉醇標準品 5mg

刺五加甙E;刺五加苷EEleutherosideE;EleutherosideE3943-26-9HPLC≥98%,20mg/支

4-(Ethoxymetxyl)pxenol 4-(ETHOXYmetxYL)pxenOL 57726-26-8

Homatropine xy7nobromide輕臭后馬托品標準品51-56-9 200mg輕臭后馬托品標準品

香蘭素 121-33-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
橢圓葉繡線菊Spiraea japonica var. ovalifolia Tormentic acid 委陵菜酸,2Α,19Α-二羥基熊果酸 13850-16-3 C30H48O5 ≥97.5%

葉綠醇YqLvchun120-86-720mg

密蒙花苷; 銀椴甙;刺蒺藜苷;銀鍛苷 Tiliroside 20316-62-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品霉素安丁三醇130552-200501僅供紅外鑒別

8-乙氧基滇烏堿 8-O-etxylyun 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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