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更新時間:2017-07-05 10:59:08瀏覽次數(shù):221次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)酵母膜蛋白提取試劑盒50T使用說明書三尖杉Cephalotaxus fortunei Taiwanhomoflavone B none 509077-91-2 C32H24O10 ≥96%
硅醋內(nèi)/偏硅醋內(nèi)/九水合硅醋二內(nèi)/九水硅wo7iumsilicctq/wo7iummqtcsilicctqhydrctqdwo7iumsilicctqtwo/ninq/ninqwctqrsilicon13217-4-3500g/GR
藍(lán)萼甲素 glaucocalyxin A 79498-31-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*04
產(chǎn)品名稱:酵母膜蛋白提取試劑盒50T使用說明書
儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能,膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。
酵母膜蛋白提取試劑盒是一種基于化學(xué)而非去污劑方法的高產(chǎn)膜蛋白提取試劑盒。酵母膜蛋白提取試劑盒可以從各種酵母樣本中提取膜蛋白,可用于純化蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。
酵母膜蛋白提取試劑盒50T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
酵母膜蛋白提取試劑盒50T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
酵母膜蛋白提取試劑盒50T使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
25332-39-2 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
異類葉升麻苷;異賣角甾苷Acteosideisomer;isoacteoside61303-13-7HPLC≥98%,20mg/支
21αH-24-Norhopa-4(23),22(29)-diene-3β,6β-diol (3BETA,6BETA,21BETA)-A'-NEO-24-NORGAMMACERA-4(23),22(29)-DIENE-3,6-DIOL 194613-74-6
蟲威 標(biāo)準(zhǔn)品 號:22248-79-9 250mg
異去甲蟛
NA 4-差向去甲*鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品(NA) 20mg
一文錢Stephania delavayi 去輕克班寧 77784-22-6 C20H19NO4 ≥95% RUSCOSAPONIN A (P1816
L-Mehionine L-甲硫安酸標(biāo)準(zhǔn)品63-68-3 200mg
Saccharin糖精標(biāo)準(zhǔn)品1981-7-2200mg
丹酚酸B 115939-25-8 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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