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更新時間:2017-07-05 10:58:50瀏覽次數(shù):118次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)酵母膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:酵母膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)
儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能,膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。
酵母膜蛋白提取試劑盒是一種基于化學(xué)而非去污劑方法的高產(chǎn)膜蛋白提取試劑盒。酵母膜蛋白提取試劑盒可以從各種酵母樣本中提取膜蛋白,可用于純化蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。
酵母膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
酵母膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補加200μL的1×Binding Buffer。
王爺葵Tithonia diversifolia Tagitinin F 圓葉腫柄菊素 F 59979-57-6 C19H24O6 ≥98%
橄欖苦苷OlquropqinHPLC≥98%,20mg/支
萊苞迪苷A;萊苞迪甙A;瑞鮑迪甙 A Rebaudioside A 58543-16-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定*100853-200601常溫,避光100mg
異莪術(shù)烯醇 Isocurcumenol 24063-71-6 20mg HPLC≥98% 異莪術(shù)烯醇
25322-68-3 聚乙二醇400標(biāo)準(zhǔn)品 1g
鹽醋*Pethidinexy7nochloride100mg
15-metxoxyMkapwanin 1309920-99-7
Midodrine Related Compound A米多君相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品3600-87-1 40mg米多君相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
阿魏酸松柏酯 63644-62-2 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
白花前胡甲素 (-)-pareruptorin A 分 子 量:386.3980 編號:73069-25-7 分子式:C21H22O7 白花前胡甲素--((-)-pareruptorin A)的詳細(xì)信息 【提取來源】本品為傘形科植物白花前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn)的根。
一葉萩Securinega suffruticosa Securinine 一葉萩減 5610-40-2 C13H15NO2 桔皮素(5827
中藥對照藥材桑葉121123-200503TLC法鑒別
Geniposide京尼平苷純度:≥98%
假黃皮Clausena excavata Mearnsitrin 楊梅酮 4'-甲醚-3-O-鼠李糖苷 30484-88-9 C22H22O12 ≥95%
大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人突觸泡蛋白(SYP)免疫試劑盒 Human synaptophysin,SYP ELISA kit
海藻糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatsolubleInterleukin6receptor,sIL-6RELISA試劑盒大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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