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更新時(shí)間:2017-07-05 10:56:31瀏覽次數(shù):95次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書(shū)
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說(shuō)明書(shū)
植物跨膜蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法南美蟛蜞菊Wedelia trilobata ent-3β-Tigloyloxykaur-16-en-19-oic acid 3ALPHA-巴豆?;趸?/span>-等效-貝殼杉-16-烯酸 79406-09-0 C25H36O4 ≥95%
大豆苷Dcidzin20mg/支
苦蒿素 Blinin 125675-09-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
對(duì)照品*130495-200202含量測(cè)定
甲基黃連堿 Worenine 38763-29-0 20mg HPLC≥98% 甲基黃連堿 38763-29-
產(chǎn)品名稱:植物跨膜蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能,在疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中扮演重要角色??缒さ鞍讟悠返闹苽湫枰浞挚紤]到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此跨膜蛋白樣本制備成為一個(gè)難以逾越的挑戰(zhàn)。
植物跨膜蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
植物跨膜蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
植物跨膜蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
25316-40-9 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
二輕丹參同ITwoxy7nogentanshinoneI8702-99-0HPLC≥98%,20mg/支
Auriculasin 昆明雞血藤素 60297-37-2
Sucrose蔗糖標(biāo)準(zhǔn)品57-50-1100mg
羅漢松樹(shù)脂酚 580-72-3 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
流亞鐵銨 Ammonium ferrous sulfate 10045-89-3 100mg
伊立替康Irinotecan20mg
ent-16β,17-Isopropylidenedioxykaurane ENT-16BETA,17-異亞丙基二氧基貝殼杉烷 58493-71-3
奇壬醇奇任醇52659-56-0Kirenol
松香酸;Abietic Acid 514-10-3 20mg 訂購(gòu)|咨詢
小鼠2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)ELISA試劑盒 ,英文名: 2,3-BPG ELISA Kit
人脫氫表雄酮(DHEA)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit 96T/48T
大鼠低密度脂蛋白受體(LDLR)免疫試劑盒 Rat low density lipoprotein receptor,LDLR ELISA Kit
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HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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人白介素29(IL-29)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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