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更新時間:2017-07-05 10:56:31瀏覽次數(shù):102次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)植物跨膜蛋白提取試劑盒100T實驗方法南美蟛蜞菊Wedelia trilobata ent-3β-Tigloyloxykaur-16-en-19-oic acid 3ALPHA-巴豆?;趸?/span>-等效-貝殼杉-16-烯酸 79406-09-0 C25H36O4 ≥95%
大豆苷Dcidzin20mg/支
苦蒿素 Blinin 125675-09-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*130495-200202含量測定
甲基黃連堿 Worenine 38763-29-0 20mg HPLC≥98% 甲基黃連堿 38763-29-
產品名稱:植物跨膜蛋白提取試劑盒100T實驗方法
儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年
產品簡介:
跨膜蛋白承擔各種生物功能,在疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色??缒さ鞍讟悠返闹苽湫枰浞挚紤]到與下游的膠分析及質譜分析等應用配套,因此跨膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。
植物跨膜蛋白提取試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
植物跨膜蛋白提取試劑盒100T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物跨膜蛋白提取試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
25316-40-9 鹽酸*標準品 50mg
二輕丹參同ITwoxy7nogentanshinoneI8702-99-0HPLC≥98%,20mg/支
Auriculasin 昆明雞血藤素 60297-37-2
Sucrose蔗糖標準品57-50-1100mg
羅漢松樹脂酚 580-72-3 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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伊立替康Irinotecan20mg
ent-16β,17-Isopropylidenedioxykaurane ENT-16BETA,17-異亞丙基二氧基貝殼杉烷 58493-71-3
奇壬醇奇任醇52659-56-0Kirenol
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