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植物質(zhì)膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T免費代測

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更新時間:2017-07-05 10:55:00瀏覽次數(shù):135次

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植物質(zhì)膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T免費代測儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 其它組分2-8℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能,扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。

植物質(zhì)膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
植物質(zhì)膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T免費代測注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
蔓荊Vitex trifolia 7,8,9,9-Tetradexy7noisolariciresinol none 357645-16-0 C20H20O6 95%

歐前胡速ImpqrctorinHPLC98%,20mg/

3-輕基巴戟醌 3-xy7noxy-morindone 20mg HPLC98% 用于含量測定

對照品*130493-200102含量測定

太子參環(huán)肽B Heterophyllin B 145459-19-4 20mg HPLC98% 太子參環(huán)肽B 145459-19
25086-15-1 甲基丙烯酸共聚物C型標準品 200mg

云南鼠尾草Salvia yunnanensis 2,24-二輕基熊果酸 143839-02-5 C30H48O5 95% 爾可定 - 對照譜圖(P100000

 Related Compound A相關(guān)物質(zhì)A標準品28910-89-630mg

Cefotetan*標準品69712-56-7500mg

西紅花苷 42553-65-1 Standard(標準);20mg 訂購|咨詢
輕臭吐根酚堿標準品 200mg

胰島速Insulin20mg

1-xy7noxy-2,3,5-trimetxoxyxanthone 22804-49-5

依法韋侖相關(guān)物質(zhì)B標準品440124-96-9cards

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