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更新時間:2017-07-05 10:52:13瀏覽次數(shù):177次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
植物葉綠體膜蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測飛龍掌血Toddalia asiatica 5,7,8-Trimetxoxycoumarin 5,7,8-*氧基 60796-65-8 C12H12O5 ≥95%
秦皮速cqsculqtin20mg/支
去芹糖桔梗皂苷D Deapio platycodinD 78763-58-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品鹽酸*130489-200202含量測定
覆盆子酮;拉斯酮 4-(4-xy7noxypxenyl)-2-butenone 5471-51-2 20mg HPLC≥98% 覆盆
產(chǎn)品名稱:植物葉綠體膜蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測
儲存條件: 蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液2-8℃保存;膜蛋白稀釋液室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
葉綠體是植物細(xì)胞所*的能量轉(zhuǎn)換細(xì)胞器,光合作用就是在葉綠體中進(jìn)行的,由于具有這一重要功能,所以葉綠體一直是細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究對象。葉綠體是植物細(xì)胞中較大的一種細(xì)胞器??缒さ鞍壮袚?dān)各種生物功能,在生物的各種發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。
植物葉綠體膜蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
植物葉綠體膜蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物葉綠體膜蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
24868-20-0 丹曲林鈉標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
菖蒲同Acorone1698-44-20mg
(+)-Rhododendrol 杜鵑醇 59092-94-3
扶甲喹 標(biāo)準(zhǔn)品 號:42835-25-6 250mg
長春花堿;Vinblastine 865-21-4 20mg 訂購|咨詢
艾納香Blumea balsamifera Ombuin 商陸黃素 529-40-8 C17H14O7 ≥98%
異補(bǔ)骨脂二輕皇同Isopsorclqntwoxy7nogqnflcvonqsHPLC≥98%;20mg/支
虎杖Polygonum cuspidatum Torachrysone 8-O-glucoside 蘆薈大黃素-8-葡萄糖甙 64032-49-1 C20H24O9 柴胡皂苷D
中藥對照藥材半夏121272-200401TLC法鑒別
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