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更新時(shí)間:2017-07-05 10:48:03瀏覽次數(shù):154次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書(shū)
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說(shuō)明書(shū)
植物核蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件:蛋白提取液,磷酸酶抑制劑2-8℃保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
植物核蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種植物細(xì)胞和各種實(shí)體植物組織,如葉片、根、種子等植物組織中提取核蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。制備的核蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于WesternBlotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、免疫共沉淀、酶活性測(cè)定等蛋白研究。
植物核蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
植物核蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
鉤藤Uncaria sessilifructus 3,6,19,23-Tetraxy7noxy-12-ursen-28-oic acid 3,6,19,23-四羥基-12-熊果-28-酸 91095-51-1 C30H48O6 ≥97%
鹽醋巴馬汀Mcrtinxy7nochloridqHPLC≥98%,20mg/支
金雞納減;奎寧 inoneine 130-95-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定奧美格雷鈉100837-200701常溫,避光100mg
利卡靈-B Li B 51020
2438-80-4 L-巖藻糖標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
二輕歐山芹醇當(dāng)歸醋酯ThetwoEuropeanmountainQinalcoholANGELOYLxy7nogen2028-13-9HPLC≥98%,20mg/支
8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione (14BETA,22E)-8,14-環(huán)氧基賣(mài)角甾-4,22-二烯-3,6-二同 1265908-20-0
鼠酮 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):83-26-1 250mg
蒼術(shù)苷鉀鹽 102130-43-8 HPLC≥98%;20
海芒果Cerbera manghas Theviridoside 黃夾苦甙 23407-76-3 C17H24O11 ≥95%
異甘草苷Isoliquiritin2041-81-620mg
苦蒿素 Blinin 125675-09-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
檢查*中間體100887-200601常溫,避光20mg
(+)-松脂素-β-D-葡萄糖苷 (+)-pinoresinol-β-D-glucoside 69251-96-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)免疫試劑盒 Human RAGE ELISA Kit
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒 紫外分光光度法 25管/24樣
RatRetinol-bindingprotein,RBPELISA試劑盒大鼠*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin1β,IL-1βELISA試劑盒人白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanMusmusculussimilarto60SribosomalproteinL12,LOC382344ELISAKit人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cardiotrophin 1 (CT-1) ELISA Kit 人心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒
Humanneuronalnuclearautoantibody,ANNA-1/HuELISAKit 人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanElastaseELISA試劑盒人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PDGFRβ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Humanpeptidoglycan,PGELISAKit人肽聚糖(PG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物核蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法人超抗原(Sag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腸病毒(Enterovirus)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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