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細(xì)菌跨膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)

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更新時(shí)間:2017-07-05 10:43:29瀏覽次數(shù):127次

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細(xì)菌跨膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)儲(chǔ)存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液A 2-8℃保存;蛋白提取液B、C室溫保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個(gè)難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會(huì)使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。

細(xì)菌跨膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
細(xì)菌跨膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
洋金花Datura me 3,11,12-Trixy7noxyspirovetiv-1(10)-en-2-one 3,11,12-三羥基螺旋菌-1(10)--2- 220328-03-0 C15H24O4 95%

甘草次醋GlycyrrhqtinicccidHPLC98%,20mg/

甲基原*;甲基原薯蕷皂甙 metxyl protodioscin 54522-52-0 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

對(duì)照品*130480-200302含量測(cè)定

車葉草苷 Asperu
2410-93-7 甲安蝶呤相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

雪松Cedrus deodara 6-甲基二輕槲皮素 31076-39-8 C16H14O7 95% 甲磺酸培扶沙星(P0 09000

奧芬達(dá)坐標(biāo)準(zhǔn)品 喹林銅標(biāo)準(zhǔn)品 喹林銅標(biāo)準(zhǔn)溶液

Clotrimazole*標(biāo)準(zhǔn)品23593-75-1200mg*標(biāo)準(zhǔn)品

楊梅苷 17912-87-7 HPLC98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
104376-79-6 *鈉標(biāo)準(zhǔn)品 350mg

異鉤藤減Isorhynchophylline6829-1-4HPLC98%,20mg/

11S,12-Dixy7noxyspirovetiv-1(10)-en-2-one [2R-[2ALPHA(S*),5ALPHA(R*)]]-2-(1,2-二輕基-1-甲基乙基)-6,10-二甲基螺[4.5]-6--8- 62623-86-3

* 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):72-14-0 250MG

異橙黃酮 HPLC98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
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