產(chǎn)品名稱：細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存； 蛋白提取液2-8℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套，因此膜蛋白樣本制備成為一個(gè)難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會(huì)使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu)，因而妨礙了膜蛋白的功能研究。

細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒是一種基于化學(xué)方法的高產(chǎn)膜蛋白提取試劑盒。細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒可以從各種菌體中提取膜蛋白，可用于純化蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。提取過程簡單方便。

細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細(xì)菌膜蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
光葉巴豆Croton laevigatus 2,3,8-Tri-O-metxylellagic acid 2,3,8-三鄰甲基鞣花酸 1617-49-8 C17H12O8 ≥98.5%

蘆薈大皇速clomodin20mg/支

積雪草苷;亞細(xì)亞皂苷 Asiaticoside 16830-15-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定*100826-200801常溫，避光100mg

貝那普利相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品15mg
23411-34-9 以兒按四乙酸鈣二鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

綿棗兒Scilla scilloides (E)-5,7-二輕基-3-(4-輕基本亞甲基)色滿-4-同 34818-83-2 C16H12O5 ≥98% 蟾酥, 華蟾酥毒基0 6565

(±)-Maackiain; dl- Maackiain高麗槐素; 馬卡因20mg/支HPLC≥98%

甲酚曲唑三硅氧烷相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品150mg甲酚曲唑三硅氧烷相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品

鹽酸黃連堿 6020-18-4 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
111-46-6 二乙二醇標(biāo)準(zhǔn)品 5ml

異槲皮苷;異櫟速;羅布麻速Isoquercitrin;Isoquercitrin;Isoquercitrin1637-2-HPLC≥98%,20mg/支

Totarol 桃柁酚 511-15-9

殘威 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào)：114-26-1 250mg

吉馬替康 292618-32-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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