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更新時(shí)間:2017-07-05 10:37:12瀏覽次數(shù):172次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
革蘭氏陰性菌蛋白提取試劑盒50T使用說明書儲(chǔ)存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;蛋白穩(wěn)定劑-20℃保存;蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
革蘭氏陰性菌蛋白提取試劑盒可以從各種革蘭氏陰性菌菌體中提取總蛋白,可用于純化蛋白的粗品制備及總蛋白制備。提取過程簡(jiǎn)單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高質(zhì)量的蛋白提供了。該試劑盒提取的蛋白具有天然活性,可用于報(bào)告基因檢測(cè)、SDS-PAGE電泳檢測(cè)、Westernblotting、凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、免疫共沉淀、酶活分析等下游實(shí)驗(yàn)。
革蘭氏陰性菌蛋白提取試劑盒50T使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
革蘭氏陰性菌蛋白提取試劑盒50T使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
何首烏Polygonum multiflorum 2,3,5,4'-Tetraxy7noxystilbene 2-O-glucoside 2,3,5,4-四羥基二本葡萄糖苷 82373-94-2 C20H22O9 ≥95%
二輕楊梅速Twoxy7nogqnmyricqtinHPLC≥98%,20mg/支
灰氈毛忍冬皂苷甲 Macranthoidin A 140360-29-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定甲磺酸安錄地平100825-200501常溫,避光100mg
貝那普利相關(guān)物質(zhì)F
23288-49-5 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
鉤吻減;鉤吻速GelsemiumelegansBenth;gelsemineHPLC≥98%;20mg/支
6-O-Vanilloylajugol 6-O-香草?;罟遣荽?/span> 124168-04-3
Calcium te (AS)碳酸鈣標(biāo)準(zhǔn)品471-34-11g碳酸鈣標(biāo)準(zhǔn)品
乳糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 63-42-3 1g 訂購|咨詢
臭靈丹Laggera pterodonta Pterodondiol 臭靈丹二醇 60132-35-6 C15H28O2 ≥99%
異槲皮苷Isoquqrcitrin20mg/支
苦參同 Kurarinone 34981-26-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定錄波必利100592-200401常溫,避光50mg
Defatted Powdered Soy大豆粉標(biāo)準(zhǔn)品68513-95-1 2.5g
小鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)ELISA試劑盒 ,英文名: GLUT4 ELISA Kit
人維生素B12(VB12)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanVitaminB12,VB12ELISAKit 96T/48T
大鼠整合素α2(ITGA2)免疫試劑盒 Rat integrin alpha-2,ITGA2 ELISA kit
英文名稱HumanPIIINISAKit人III型前膠原氨基端肽(PIIINT)規(guī)格:96T/48T
動(dòng)物組織醛同還原酶1C(aldo-ketoreductase1C)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitPPAR-γ兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ規(guī)格:48T/96T
兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human adenovirus IgM (ADV-IgM) ELISA Kit 人腺病毒IgM(ADV-IgM)ELISA試劑盒
Humananti-EndomysialAntibodyIgA,EMAIgAELISAKit 人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumandipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISA試劑盒人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織NADPH細(xì)胞色素C還原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
humanphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISAKit人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
革蘭氏陰性菌蛋白提取試劑盒50T使用說明書人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人低分子量細(xì)胞角蛋白(CK-LMW)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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