大腸桿菌蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)注意事項(xiàng)

（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
大腸桿菌蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)儲存條件：蛋白穩(wěn)定劑、蛋白酶抑制劑-20℃保存；磷酸酶抑制劑2-8℃保存；蛋白提取液室溫保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

大腸桿菌總蛋白提取試劑盒可以從各種菌體中提取總蛋白，可用于純化蛋白的粗品制備及總蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高質(zhì)量的蛋白提供了。該試劑盒提取的蛋白具有天然活性，可用于報(bào)告基因檢測、SDS-PAGE電泳檢測、Westernblotting、凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、免疫共沉淀、酶活分析等下游實(shí)驗(yàn)。

大腸桿菌蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司大腸桿菌蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購模式！我們將竭誠為您服務(wù),咨詢！
大葉藤黃Garcinia xanthochymus 2,2',3'-Trixy7noxy-4,6-dimetxoxybenzopxenone (2,3-二羥基本基)(2-羥基-4,6-二甲氧基本基)甲酮 219861-73-1 C15H14O6 ≥95%

丹皮酚Pcqonol20mg/支

黃杞苷 Engeletin 572-31-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*130451-200302含量測定

Speciophylline (Unenine D)恩卡林堿D純度：>95%
22916-47-8 咪康唑標(biāo)準(zhǔn)品(危險(xiǎn)品) 200mg

基*metxylhesperidin11013-97-120mg

Yuheinoside YUHEINOSIDE 72396-01-1

野燕枯 標(biāo)準(zhǔn)品 號：43222-48-6 1000mg

3,5-O-二?；鼘幩?/span>;3,5-D 2450-53-5 20mg 訂購|咨詢
25332-39-2 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

異類葉升麻苷;異賣角甾苷Acteosideisomer;isoacteoside61303-13-7HPLC≥98%,20mg/支

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蟲威 標(biāo)準(zhǔn)品 號：22248-79-9 250mg

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