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更新時(shí)間:2017-07-05 10:34:17瀏覽次數(shù):231次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
甲醛固定組織蛋白提取試劑盒50T使用說明書大戟科植物鐵海棠 Euphorbia milii ch.des moulins的花 12-O-tetradecanoyl phorbol- 13-acetate 佛波醇 16561-29-8 C36H56O8 ≥98%
丹參同IIATcnshinonqIIc20mg/支
黃芪皂苷II;黃芪皂甙II Astragaloside II 84676-89-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定安汀100816-200701-20℃,避光50mg
CIV標(biāo)準(zhǔn)品1950-6-6200mg
產(chǎn)品名稱:甲醛固定組織蛋白提取試劑盒50T使用說明書
儲(chǔ)存條件:室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
甲醛固定組織蛋白提取試劑盒適用于從各種經(jīng)甲醛固定的組織樣本中提取總蛋白,提取過程簡(jiǎn)單方便,提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
甲醛固定組織蛋白提取試劑盒50T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
甲醛固定組織蛋白提取試劑盒50T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
甲醛固定組織蛋白提取試劑盒50T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
22884-10-2 唑來瞵酸相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg
大黃 Rheum officinale Baill 雙醋瑞應(yīng) 13739-02-1 C19H12O8 ≥98% 輕基脲(Y0000119
Amrinone Related Compound C安力農(nóng)相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品50mg
Crospovidone交聯(lián)聚維酮對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品9003-39-8100mg交聯(lián)聚維酮對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品
升麻素 37921-38-3 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
高山紅景天 Rhodiola sachalinensis 2g
異蓮心減Isoliqnsininq6817-41-0HPLC≥98%,20mg/vial
鬧羊花毒素V Rhodojaponin V 37720-86-8 HPLC≥98% 5mg/支
含量測(cè)定*130461-2005012-8℃,避光200mg
喬松素;松屬素 pinocembrin 480-39-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
小鼠葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA試劑盒 ,英文名: GUSβ ELISA Kit
人維生素D(VD)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanVitaminD,VDELISAKit 96T/48T
大鼠粘膠蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)免疫試劑盒 Rat Tenascin-C,TN-C ELISA Kit
英文名稱HumanCTX-IELISAKit人I型膠原C端肽規(guī)格:96T/48T
動(dòng)物組織醛同還原酶1E(aldo-ketoreductase1E)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitLebtospira兔鉤端螺旋體IgG規(guī)格:48T/96T
兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human fibronection related antigen (FRA) ELISA Kit 人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)ELISA試劑盒
Humananti-endothelialcellantibody,AECAELISAKit 人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humandesmogleins1,DGS-E1ELISA試劑盒人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織MAPKAPKINASE5激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
HumanPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲醛固定組織蛋白提取試劑盒50T使用說明書人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人二磷酸腺苷(ADP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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