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更新時間:2017-07-05 10:34:03瀏覽次數(shù):168次
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內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白提取試劑盒50T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白提取試劑盒50T實驗方法
儲存條件:2-8℃保存。開蓋后組份按要求條件保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)存在于除哺乳動物成熟的紅細胞外的各種真核細胞中。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)為由生物膜構(gòu)成的互相通連的片層隙狀或小管狀系統(tǒng),膜片間的隙狀空間成為池,通常與細胞外隙和細胞漿基質(zhì)之間不直接相通。這種細胞內(nèi)的膜性管道系統(tǒng)一方面構(gòu)成細胞內(nèi)物質(zhì)運輸?shù)耐罚矸矫鏋榧毎麅?nèi)各種各樣的酶反應提供廣闊的反應面積。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能與蛋白質(zhì)的合成,糖類和脂類的合成、解毒、同化作用有關(guān),并且還具有運輸?shù)鞍踪|(zhì)的功能。
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白提取試劑盒50T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白提取試劑盒50T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
鉤吻Gelsemium elegans 1,6,8-Trideoxyshanzhigenin 1,6,8-三脫氧山梔苷元 99173-00-9 C10H14O3 ≥90%
丹參同IIA-磺醋內(nèi)wo7iumtcnshinonqIIc-sulfonctqUV≥98%;20mg/支
黃芪皂苷I;黃芪皂甙I Astragaloside I 84680-75-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
標準試劑2-本乙酰胺130448-200501系統(tǒng)適用性
SoyasaponinⅤ(Soyasaponin Ba
22871-58-5 典昔蘭相關(guān)物質(zhì)A標準品 100mg
*Andrographis paniculata *黃同苷C 113963-39-6 C23H24O10 ≥95% 維拉帕米 雜質(zhì)M(V0100026
(Z)-3-xy7noxy-5-metxoxystilbene 143207-76-5
錄霉素A多晶型標準品530-43-8100mg錄霉素A多晶型標準品
馬兜鈴酸A 313-67-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
云南含笑Michelia yunnanensis Pinoresinol 4-O-glucoside 松脂醇-4-O-beta-D-葡萄糖苷 69251-96-3 C26H32O11 ≥97%
異蓮心減IsoliqnsininqHPLC≥98%;20mg/支
地榆Sanguisorba officinalis Ziyuglycoside II 地榆皂苷Ⅱ 35286-59-0 C35H56O8 ≥98%
中藥對照藥材天121361-200401TLC法鑒別
wilfordine*定堿純度:≥97%
小鼠前動力蛋白2(PK2)ELISA試劑盒 ,英文名: PK2 ELISA Kit
人維生素D2(VD2)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T
大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)免疫試劑盒 Rat Integrin αM,ITG/CD11b ELISA Kit
英文名稱HumanCollagenTypeIIELISAKit人II型膠原(CollagenTypeII)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
動物組織醛同還原酶1A(aldo-ketoreductase1A)活性比色法定量檢測試劑盒20次
其它ELISA試劑盒
兔子生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat nitric oxide (NO) ELISA Kit 大鼠血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒
HumanComplement3,C3ELISAKit 人補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humandesmin,DesELISA試劑盒人結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織MAPKAPKINASE3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit人磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白提取試劑盒50T實驗方法人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人反*狀腺原酸(rT3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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