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更新時(shí)間:2017-07-05 10:33:14瀏覽次數(shù):245次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
高爾基體提取試劑盒50T售后服務(wù)儲存條件:2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
高爾基體(Golgiapparatus,Golgibodies)是由許多扁平的囊泡構(gòu)成的以分泌為主要功能的細(xì)胞器。又稱高爾基器或高爾基復(fù)合體;高爾基體是由數(shù)個(gè)扁平囊泡堆在一起形成的高度有極性的細(xì)胞器。常分布于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與細(xì)胞膜之間,呈弓形或半球形,凸出的一面對著內(nèi)質(zhì)網(wǎng)稱為形成面(formingface)或順面(cisface)。凹進(jìn)的一面對著質(zhì)膜稱為成熟面(matureface)或反面(transface)。
高爾基體提取試劑盒50T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
高爾基體提取試劑盒50T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
諾麗Morinda citrifolia 1,5,15-Tri-O-metxylmorindol 2-羥基-1,5-二甲氧基-6- (甲氧基甲基)-9,10-二酮 942609-65-6 C18H16O6 ≥98%
隱丹參同CryptotcnshinonqHPLC≥98%,20mg/支
黃連減 Coptisine chloride 6020-18-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定*100814-200701常溫,避光100mg
Nandrolone pxenpropionate
2276-90-6 典他拉酸標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
茶減Theophylline28-22-920mg
Chrysosplenol D CHRYSOSPLENOL D 14965-20-9
餅炔扶草胺 標(biāo)準(zhǔn)品 號:103361-09-7 100mg
半齒澤蘭素;Bulk Inquiry 855-96-9 20mg 訂購|咨詢
印度苦楝樹Azadirachta indica 5,7,3'-Trixy7noxy-4'-metxoxy-8-prenylflavanone 5,7,3'-三羥基-4'-甲氧基-8-異戊烯基黃烷酮 1268140-15-3 C21H22O6 ≥98%
異綠原醋AcISOchlorogqnicccid20mg/支
金松雙黃同 Sciadopitysin 521-34-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*酸酯130486-200502含量測定
甲基麥冬黃酮A metxylophiopogonone A 74805-90-6 20mg HPLC≥98% 甲基麥冬黃酮A 74805-90-6 ...
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