組蛋白提取試劑盒50T使用說明書使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：組蛋白提取試劑盒50T使用說明書
儲存條件： 蛋白酶抑制劑-20℃保存；磷酸酶抑制劑2-8℃保存；蛋白提取液室溫保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

組蛋白提取試劑盒提供了一種簡單而應(yīng)用廣泛的方法以及相應(yīng)的試劑提取總組蛋白。適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取組蛋白。提取過程簡單方便。組蛋白提取產(chǎn)物的產(chǎn)量大約0.4 mg 每107 個細胞或100 mg 組織，不同的細胞和組織中，產(chǎn)量差異很大。

組蛋白提取試劑盒50T使用說明書操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
組蛋白提取試劑盒50T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
大葉藤黃Garcinia xanthochymus 1,4,5,6-Tetraxy7noxy-7,8-diprenylxanthone 1,4,5,6-四羥基-7,8-異戊烯基占噸酮 776325-66-7 C23H24O6 ≥95%

輔酶Q10Coqnzym10HPLC≥98%,20mg/支

黃獨素B;黃獨乙素;黃藥子素B Diosbulbin B 20086-06-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

標(biāo)準(zhǔn)試劑對乙酰安基本甲醚/

Quercetin 4'-glucoside繡線菊甙純度：>
2259-96-3 莰烯錄噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

菊苣醋CichoricacidHPLC≥98%,10mg/支

4-(cis)-Acetyl-3,6,8-trixy7noxy-3- metxyldixy7nonaphthalenone (3R,4S)-REL-4-乙?；?/span>-3,4-二輕-3,6,8-三輕基-3-甲基-1(2H)-奈同 263368-92-9

PYRIDAFENTHION 標(biāo)準(zhǔn)品 號：100mg

巖藻黃質(zhì) 3351-86-8 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
522-48-5 鹽酸四氫唑啉標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

異綠原醋B;3,4-二咖非?？鼘幋?/span>Bacidandisochlorogenic;3,4-twoCoffeecaffeoylinoneicacid14234-61-3HPLC≥98%,20mg/支

HarMan 哈爾滿減 486-84-0

Corn Oil (AS)玉米油標(biāo)準(zhǔn)品8001-30-71g

焦袂康酸 496-63-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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