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更新時間:2017-07-05 10:28:36瀏覽次數(shù):331次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
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腦組織蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法儲存條件: 蛋白酶抑制劑-20℃保存;
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
腦組織總蛋白提取試劑盒適用于從各種哺乳動物腦組織中提取總蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。
腦組織蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
腦組織蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
廣玉蘭Magnolia grandiflora Syringin pentaacetate 五乙酸紫丁香甙酯 92233-55-1 C27H34O14 ≥95%
*qugqnolHPLC≥98%,0.5ml/支
花旗松素;黃杉素,紫杉葉素,二輕槲皮素、蚊母樹素 Taxifolin 480-18-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*130437-200502含量測定
Petunidin 3-galactoside chloride矮牽牛素半乳糖苷純度:>98%
22189-32-8 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
皇芪苷Astragaloside84687-43-4HPLC≥98%,20mg/支
Paeonilactone C (3S,3AR,6S,7AR)-3-[(本甲?;趸?/span>)甲基]四輕-6-輕基-6-甲基-2,5(3H,4H)-本并呋喃二同 98751-77-0
芝麻油相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品64550-34-1 6mg×3vials
輪環(huán)藤寧 294-90-6 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
賓鼠尾草Salvia dugesii Tilifodiolide none 126724-95-6 C20H16O5 ≥98%
異牡荊苷Isovitqxin970-2-820mg
莽草酸 Shikimic acid 138-59-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定*100893-200601常溫,避光100mg
1,5-二??鼘幩?/span>;洋薊素,洋薊酸,朝鮮薊酸,朝薊素,菜薊素 1,5-Dicaffeoylinoneic acid 30964-13-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
小鼠二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)ELISA試劑盒 ,英文名: DPYD ELISA Kit
人未磷酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISA檢測試劑盒HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 96T/48T
大鼠前列腺素F合成酶(PGFS)免疫試劑盒 Rat prostaglandin F synthase,PGFS ELISA Kit
英文名稱RatAT-IIIELISAKit大鼠抗*(AT-III)規(guī)格:96T/48T
簡單細(xì)菌酚品紅染色試劑盒50次
ELISAKitVK1人維生素K1規(guī)格:48T/96T
兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 大鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒
HumanThyroglobulin,TGELISAKit 人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCytotoxin-associatedprotein,CagAELISA試劑盒人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
腦組織蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法人孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鉤端螺旋體抗體(Lep-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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