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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測(cè)>> RIPA 裂解液 (不含triton x-100)100ml免費(fèi)代測(cè)
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更新時(shí)間:2017-07-05 10:28:16瀏覽次數(shù):165次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
RIPA 裂解液 (不含triton x-100)100ml免費(fèi)代測(cè)丁香 Syzygium aromaticum (L.)Merr. et Perry Syringic acid 丁香酸 530-57-4 C9H10O5 ≥98%
皇楊減HucngYcngjicn20mg/支
花椒毒素;8-甲氧基補(bǔ)骨脂素; 花椒毒內(nèi)酯,氧化補(bǔ)骨脂素,黃原毒 8-metxoxypsoralen 298-81-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定扶伐他汀鈉100800-200701常溫,避光100mg
Atracurium Besylate本磺酸阿曲庫銨標(biāo)準(zhǔn)品64228-8
產(chǎn)品名稱:RIPA 裂解液 (不含triton x-100)100ml免費(fèi)代測(cè)
儲(chǔ)存條件:裂解液2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
RIPA裂解液采用優(yōu)質(zhì)原料配制,對(duì)動(dòng)物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用,是經(jīng)典常用的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等下游實(shí)驗(yàn)。
RIPA 裂解液 (不含triton x-100)100ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
RIPA 裂解液 (不含triton x-100)100ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
RIPA 裂解液 (不含triton x-100)100ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
2216-51-5 薄荷醇標(biāo)準(zhǔn)品 250mg
L-脯安醋TheL-Pro147-82-3100mg
2'-O-metxylperlatolic acid 2'-O-甲基配列地衣酸 38968-07-9
wo7ium Bromide*標(biāo)準(zhǔn)品7647-15-6 1g*標(biāo)準(zhǔn)品
甘油三油酸酯;Triolein 122-32-7 50mg 訂購(gòu)|咨詢
刺柏Juniperus formosana Oleuropeic acid 8-O-glucoside none 865887-46-3 C16H26O8 ≥95%
異牡荊速Isovitqxin20mg/支
云南蘿芙木Rauvolfia yunnanensis Tombozine 妥包嗪 604-99-9 C19H22N2O 次烏頭減(5897
含量測(cè)定*100384-2005012-8℃,避光0.5ml
Penicillamine Disulfide 二硫*標(biāo)準(zhǔn)品20902-45-8 100mg
大鼠突觸蛋白1(Syn1)ELISA試劑盒 ,英文名: Syn1 ELISA Kit
人胃癌標(biāo)志物ELISA檢測(cè)試劑盒humangastriccarcinomaMarkerELISAKit 96T/48T
倉(cāng)鼠白介素6(IL-6)免疫試劑盒 Hamster Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
CLIAKitforPTK/CD115(Humanproteintyrosinekinase)ELISAKit人蛋白*激酶規(guī)格:48T/96T
石蠟切片中性脂質(zhì)蘇丹黑間接染色試劑盒10次
ELISAKitGAD-Ab人*脫羧酶自身抗體規(guī)格:48T/96T
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
HumanAnti-mitochondriaautoantibodies,AMAELISAKit 人抗線粒體抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancytotoxin,CTXELISA試劑盒人細(xì)胞毒素(CTX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織IKKα激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Humanplasminogenactivator,PLGAELISAKit人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
RIPA 裂解液 (不含triton x-100)100ml免費(fèi)代測(cè)人*S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*(GSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人谷酸脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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