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更新時間:2017-07-05 10:26:20瀏覽次數(shù):126次
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線粒體膜/胞漿蛋白提取試劑盒100T使用說明書儲存條件: 試劑AB于2-8℃保存,*存放于-20℃保存;試劑D于2-8℃保存試劑C和E室溫保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
線粒體膜蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取線粒體膜蛋白和胞漿蛋白。提取過程簡單方便。制備的線粒體蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。
線粒體膜/胞漿蛋白提取試劑盒100T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
線粒體膜/胞漿蛋白提取試劑盒100T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
獐牙菜 Swertia bimaculata (Sieb.et Zucc.) Swertiamarine 獐芽菜苦苷 17388-39-5 C16H22O10 ≥98%
各塞定NqtworkScidingHPLC≥98%,20mg/支
槲皮苷;榭黃甙;槲皮甙;櫟素;橡皮苷 Quercitrin 522-12-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品雙氫本甘安酸130434-200202檢查
Peonidin 3-glucoside chloride錄化葡萄糖苷芍藥素純度:>98%
221176-49-4 *相關物質(zhì)B標準品 15mg
澤瀉 Alisma orientalis (Sam.)Juzep. 環(huán)氧澤瀉烯 87701-68-6 C15H26O2 ≥98% 心可泥定0 6505
Torilolone 13018-09-2
Chlorzoxazone錄唑沙宗標準品95-25-0350mg錄唑沙宗標準品
黑介子苷 3952-98-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
鐵莧菜 Acalypha australis 2g
異歐前胡速ISOquropqbqforqHuSu48-42-1HPLC≥98%,20mg/vial
鬧羊花毒素III Rhodojaponin-III 26342-66-5 HPLC≥98% 10mg/支
二氫楊梅素27200-12-0Dixy7nomyricetin
茄尼醇 Solanesol 13190-97-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 ,英文名: Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit
人*(Pepsin)ELISA檢測試劑盒HumanPepsinELISAKit 96T/48T
甲型流感H5N1(Avian Flu)HA 免疫試劑盒 Influenza A H5N1(Avian Flu)HA ELISA Kit
CLIAKitforPON(Humanparaoxonase)ELISAKit人對氧磷酶規(guī)格:48T/96T
石蠟切片組織P21蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
ELISAKitrT3人反三碘甲狀腺原氨酸規(guī)格:48T/96T
兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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Humanplaetbasicprotein,PBPELISAKit人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
線粒體膜/胞漿蛋白提取試劑盒100T使用說明書人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人冠狀病毒(CoronavirusesIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人寡聚蛋白(oligomeric)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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