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神經(jīng)元蛋白提取試劑盒100T使用說(shuō)明書

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更新時(shí)間:2017-07-05 10:21:48瀏覽次數(shù):195次

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神經(jīng)元蛋白提取試劑盒100T使用說(shuō)明書儲(chǔ)存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白穩(wěn)定劑2-8℃保存;蛋白提取液室溫保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

神經(jīng)元蛋白提取試劑盒適用于從動(dòng)物神經(jīng)元細(xì)胞中提取總蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。本試劑盒含有的*配方能夠溶解細(xì)胞膜包括細(xì)胞質(zhì)膜和核膜,并能有效提取神經(jīng)微管的表面蛋白。

神經(jīng)元蛋白提取試劑盒100T使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
神經(jīng)元蛋白提取試劑盒100T使用說(shuō)明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
大葉藤黃Garcinia xanthochymus Subelliptenone G 1,4,5-三羥基呫噸酮 162473-22-5 C13H8O5 98%

絞股藍(lán)皂苷GypqnosidqsUV98%,20mg/

胡椒減;胡椒酰安 Piperine 94-62-2 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

對(duì)照品*雜質(zhì)A130428-200503檢查

Malvidin 3-glucoside chloride錄化錦葵色素-3-Β-葡糖苷純度:>98%
21829-25-4 硝本地平標(biāo)準(zhǔn)品 125mg

皇獨(dú)速B;皇獨(dú)速;皇藥子速BDiosbulbinB;DioscoreabulbiferaB;DioscoreabulbiferaLB0086-06-0HPLC98%,20mg/

3-Epiglochidiol diacetate 3-表算盤子二醇二乙酸酯 6587-37-7

Silybin *標(biāo)準(zhǔn)品22888-70-6 50mg*標(biāo)準(zhǔn)品

當(dāng)藥黃素 HPLC98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
尖頭瓶爾小草Ophioglossum pedunculosum Tetraxy7noepiberberine Sinactine 四氫表小檗堿 38853-67-7 C20H21NO4 95%

異數(shù)李速-3-O-半乳糖苷Isorhcmnqtin-3-O-gclcctosidcsq6743-9-620mg

馬錢苷;馬錢素; 馬錢子苷;番木鱉苷 Loganin 18524-94-2 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

對(duì)照品*130523-200201含量測(cè)定

山姜素 Alpinetin 36052-37-6 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定
大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人胃泌素(Gastrin)免疫試劑盒 Human Gastrin ELISA Kit

酸激酶(PK)測(cè)試盒 可見分光光度法 50/48

Ratplaetactivatingfactor,PAFELISA試劑盒大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISA試劑盒人細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanmembranecofactorprotein,MCPELISAKit人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat vascular endothelial cell growth factor B (VEGF-B) ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒

HumanCathepsinAntibodies,CathAbELISAKit 人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancysteinylleukotrienes,CysLTsELISA試劑盒人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性檢測(cè)試劑盒20

HumanPodocalyxin,PCXELISAKit人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
神經(jīng)元蛋白提取試劑盒100T使用說(shuō)明書人肌抑素(MSTNELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人肌養(yǎng)蛋白(dystrophin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人肌細(xì)胞生成素(MYOG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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