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酵母蛋白裂解液50ml實驗方法

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更新時間:2017-07-05 10:13:09瀏覽次數(shù):144次

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公司供應(yīng)的酵母蛋白裂解液50ml實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

產(chǎn)品名稱:酵母蛋白裂解液50ml實驗方法
儲存條件:室溫保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

酵母蛋白裂解液用于對酵母的裂解。酵母裂解液已含常用蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑。

酵母蛋白裂解液50ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
酵母蛋白裂解液50ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
酵母蛋白裂解液50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
植物牛膝Achyranthes bidentata Bl Stachysterone D 旌節(jié)花甾酮D 26361-67-1 C27H42O6 98%

芹菜速cpigqninHPLC98%;20mg/

光甘草定 Glabridin 59870-68-7 20mg HPLC98% 用于含量測定

UV法含量測定*100776-200501常溫,避光100mg

本那普利相關(guān)化合物E標(biāo)準(zhǔn)品25mg
2078-54-8 *標(biāo)準(zhǔn)品 290MG

B-蒎烯B-pinene17-91-320mg

Cyclocerberidol (1R-反式)-7-輕基-7-(輕基甲基)-2-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚烷-1-乙醇 126594-66-9

metxscopolamine Bromide *標(biāo)準(zhǔn)品155-41-9 200mg*標(biāo)準(zhǔn)品

L-谷酰胺;L-Glutamine 56-85-9 20mg 訂購|咨詢
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