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更新時(shí)間:2017-07-04 14:41:34瀏覽次數(shù):135次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
細(xì)菌裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法日本繡線菊Spiraea japonica Spiramine A 繡線菊堿A 114531-28-1 C24H33NO4 ≥98.5%
齊墩果醋OlqcnolicccidHPLC≥98%,20mg/支
枸櫞酸;檸檬酸 Citric Acid 77-92-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
檢查用鹽酸扶西汀雜質(zhì)C100774-200401常溫,避光10mg
本托沙敏相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品50mg
產(chǎn)品名稱:細(xì)菌裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件:裂解液室溫保存;抑制劑-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
細(xì)菌裂解液采用優(yōu)質(zhì)原料配制,用于細(xì)菌菌體的裂解,用于細(xì)菌蛋白提取,裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western等下游實(shí)驗(yàn)。
細(xì)菌裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
細(xì)菌裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
細(xì)菌裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
2058-46-0 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
醋棗仁皂甙B;醋棗仁皂苷BJujubosideBandJujubosideB;22466-02-HPLC≥98%,20mg/支
Chloroenhydrin 沼菊素錄海德林 38230-99-8
噻菌靈 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):148-79-8 250mg
8-香葉草氧基補(bǔ)骨脂素 7437-55-0 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
女貞Ligustrum lucidum Oleonuezhenide 青藤堿 112693-21-7 C48H64O27 ≥95%
異戊二烯Isoprqnq0.5mL/支
兩面針 Zanthoxylum nitidum (Roxb.)DC. Toddalolactone 毛兩面針?biāo)?/span> 483-90-9 C16H20O6 刺芒柄花素(5 52
檢查用*100381-200301常溫,避光50mg
Dioxybenzone二羥本宗標(biāo)準(zhǔn)品131-53-3150mg
大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人硒蛋白P(SEPP1)免疫試劑盒 Human Selenoprotein P,SEPP1 ELISA kit
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ活性測(cè)試盒 紫外分光光度法 25管/24樣
RatPepsin,PPELISA試劑盒大鼠*(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanImmunoglobulinG,IgGELISA試劑盒*G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmatrixmetalloproteinase4,MMP-4ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat sex hormone binding globulin (SHBG) ELISA Kit 大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒
Humantubularbasementmembraneantibogy,TBMELISAKit 人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCTX-2ELISA試劑盒人骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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Humanproliferatingcellnuclearantigenantibody,PCNAELISAKit人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)菌裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法人抗SS-B/La抗體ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗SS-A/Ro抗體ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗sp100抗體(sp100)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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