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更新時(shí)間:2017-07-04 14:39:18瀏覽次數(shù):177次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
IP細(xì)胞裂解液50ml售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
產(chǎn)品名稱:IP細(xì)胞裂解液50ml售后服務(wù)
儲(chǔ)存條件:裂解液2-8℃保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
IP組織細(xì)胞蛋白裂解液是一種在非變性條件下裂解細(xì)胞和組織的裂解液。能裂解細(xì)胞并充分釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白產(chǎn)物大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的細(xì)胞和組織樣本,主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀等。
IP細(xì)胞裂解液50ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
IP細(xì)胞裂解液50ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
綿棗兒Scilla scilloides Specioside 黃金樹苷 72514-90-0 C24H28O12 ≥95%
*元Diosgqnin20mg/支
戈米心G Gomisin G 62956-48-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
對(duì)照品*S異構(gòu)體0412-9601檢查
Delphinidin 3,5-diglucoside chloride飛燕草素3,5-葡萄糖苷純度:>98%
20(S)原人參三醇 34080-08-5 檢測(cè)用對(duì)照品 (S型)原人參三醇
老鸛草Geranium robertianum L. 5-metxyl-7- metxoxyisoflavone 5-甲基-7-甲氧基異黃同 82517-12-2 C17H14O3 *(100455
鑒別茴香醛110838-200605常溫,避光1ml
克利溴銨相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品250mg
人參Panax ginseng C.A.Mey Ginsenoside RK3 人參皂苷RK3 364779-15-7 ≥98%
滇西八角 Illicium merrillianum Taxifolin 3-O-xyloside 紫杉葉素 3-O-beta-D-木糖苷 40672-47-7 C20H20O11 ≥95%
異澤蘭皇速qupctilin368-1-420mg
龍腦;2-茨醇; 天然片; 右旋龍腦 Borneol 507-70-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
HPLC法含量測(cè)定*100861-200601常溫,避光100mg
遠(yuǎn)志皂苷元 Senegenin 2469-34-3 20mg/支 HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
大鼠雄激素(androgen)ElISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human cytotoxin-associated protein(CagA)antibody(IgG)ELISA kit
羥脯酸(HYP)測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA試劑盒大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanIg-liketranscriptsReceptor,ILTsRELISA試劑盒*樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmatrixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human pentosidine ELISA Kit (Pentosidine) 人戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒
HumanBeta-Endorphinreceptor,β-EPRELISAKit 人β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCross-linkedCarboxy-terminalopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTPELISA試劑盒人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織D-葡萄糖激酶法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit人前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
IP細(xì)胞裂解液50ml售后服務(wù)人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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