產(chǎn)品名稱(chēng)：Western細(xì)胞裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件：裂解液室溫保存；蛋白酶抑制劑-20℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Western組織細(xì)胞蛋白裂解液是一種在非變性條件下裂解細(xì)胞和組織的裂解液。能裂解細(xì)胞并充分釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白產(chǎn)物大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的細(xì)胞和組織樣本，主要用于Western，免疫沉淀和免疫共沉淀等。

Western細(xì)胞裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Western細(xì)胞裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Western細(xì)胞裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
廣玉蘭Magnolia grandiflora Spathulenol *烯醇 6750-60-3 C15H24O ≥97%

*Dioscin20mg/支

遠(yuǎn)志皂苷B;遠(yuǎn)志精Ⅲ Onjisaponin B; Senegin III 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

含量測(cè)定100770-200401常溫，避光100mg

本妥英相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品6802-95-5 50mg
20(S)-原人參三醇 20(S)-protopanaxatriolthreealcohol 20mg

巴戟天隊(duì)照品Morindaofficinalishowcontrolproducts1g

Serpentine SERPENTINE 18786-24-8

川皮亭;蜜橘黃素川陳皮素478-01-3Nobiletin

衛(wèi)矛醇;Dulcitol 608-66-2 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
10-* 10-xy7noxycamptothecin 分 子 量：364.3500 編號(hào)：64439-81-2 分子式：C20H16N2O5 10-*--(10-xy7noxycamptothecin)的詳細(xì)信息 【藥理性質(zhì)】10-*可選擇性地抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶(Topoisor-Merase)干擾DNA的復(fù)制。與其它常用的抗癌藥無(wú)交叉耐藥性，因而對(duì)耐藥性有效。*的抗癌作用相當(dāng)于*的30倍，主要用于消化系統(tǒng);胃癌、食道癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肝癌等;對(duì)口腔、頸面部癌、頭頸部癌、頭頸部圓柱型腺癌及膀胱癌也有較好療效;對(duì)惡性葡萄胎，絨毛膜上皮癌、肺癌、急慢性粒細(xì)胞、白血病，銀屑病，治疣，及血吸蟲(chóng)病引起的肝脾腫大等也具有一定的療效。

益母草 Leonurus sibiricus Stachydrine xy7nochloride 言酸水蘇減 4136-37-2 C7H14NO2.Cl 蜂毒肽(5862

含量測(cè)定鹽酸屈嗪100263-200301常溫，避光50mg

扶康唑相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品514222-44-7 10mg

桑樹(shù)Morus alba L. Mulberroside A 桑皮苷A 102841-42-9 C26H32O14 ≥98%
大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)免疫試劑盒 Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISA Kit

乙酰*酯酶(AchE)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA試劑盒大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanImmuneRNA,IrnaELISA試劑盒人免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanMatrixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Neonatal rat thyroxine (NN-T4) ELISA Kit 大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒

Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCrosslaps,CrELISA試劑盒人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織DYRK1A激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

humanProstaglandinF，PG-FELISAKit人前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Western細(xì)胞裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗核因子抗體(ANF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝