RIPA裂解液（蛋白裂解液）100ml實(shí)驗(yàn)方法半枝蓮Scularia barbata Scutebarbatine B 半枝蓮堿 B 905929-95-5 C33H35NO7 ≥97%

人參皂苷RfGinsqnosidqRf20mg/支

*內(nèi)酯;*乙素，雄茸內(nèi)脂 Andrographolide 5508-58-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材山臘梅葉121538-200501TLC法鑒別

EUPALITIN 蒿純度：>95%

產(chǎn)品名稱：RIPA裂解液（蛋白裂解液）100ml實(shí)驗(yàn)方法
儲存條件：裂解液室溫保存；抑制劑-20℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

RIPA裂解液采用優(yōu)質(zhì)原料配制，對動物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用，是經(jīng)典常用的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等下游實(shí)驗(yàn)。RIPA裂解液中已含常用磷酸酶抑制劑。

RIPA裂解液（蛋白裂解液）100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
RIPA裂解液（蛋白裂解液）100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
RIPA裂解液（蛋白裂解液）100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
17-氫-9-去氫*內(nèi)酯-19-流 17- xy7nogen-9- dexy7noandrographolide-19- sulfate 20mg

墨旱蓮隊照藥材Ecliptacontrolmedicine1g

Dixy7notanshinone I 二輕丹參同 I 87205-99-0

Palmitic Acid 棕櫚酸標(biāo)準(zhǔn)品1957-10-3500mg棕櫚酸標(biāo)準(zhǔn)品

柚皮苷;Naringin 10236-47-2 20mg 訂購|咨詢
*雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 ea

硬脂醋酯Stearicacidmetxylester50mg

Ayanin 572-32-7

Naproxen wo7ium 普生鈉標(biāo)準(zhǔn)品26159-34-2 200mg普生鈉標(biāo)準(zhǔn)品

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