當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 蛋白酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-04 14:24:53瀏覽次數(shù):223次
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儲存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
本蛋白酶抑制劑混合物包含7種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶、金屬蛋白酶等。
此抑制劑混合物為100 倍濃縮DMSO 溶液,適用于從哺乳動物細(xì)胞、組織中提取蛋白,直接加入任何組織類型和細(xì)胞的裂解產(chǎn)物中,均能有效抑制蛋白酶的活性,更高效的提取目的蛋白。
蛋白酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
蛋白酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
廣金錢草Herba Desmodii Styracifolii Schaftoside 夏佛塔苷 51938-32-0 C26H28O14 ≥98%
連翹苷Phillyrin20mg/支
酯蟾毒配基;蟾力蘇 Resibufogenin 465-39-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材*121522-200501TLC法鑒別
BOSWELLIC ACID, a- 乳香酸純度:>95%
16846-24-5 Josamycin標(biāo)準(zhǔn)品 (150mg)(-20℃) 150mg
洋金花Datura me [2R-[2ALPHA(R*),5ALPHA(R*)]]-2-(1,2-二輕基-1-甲基乙基)-6,10-二甲基螺[4.5]癸-6-烯-8-同 62574-30-5 C15H24O3 ≥95% 半庫溴銨:用于系統(tǒng)適用性試驗(Y0000577
Aminobutanol安基丁醇標(biāo)準(zhǔn)品96-20-8500mg
萬乃洛韋相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品15mg
貝母素甲 23496-41-5 HPLC≥98%;
* Ginseng stem andYe Zaogan 50mg
柚皮速Naringenin480-41-120mg
Rauvoyunine C 1211543-01-9
人參皂苷CK分子式: C36H62O8
L-絲酸;L-Serine 56-45-1 100mg 訂購|咨詢
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