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更新時間:2017-07-04 14:20:33瀏覽次數(shù):113次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:細(xì)胞質(zhì)膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)
產(chǎn)品簡介:
膜蛋白承擔(dān)各種生物功能,在疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。
細(xì)胞質(zhì)膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細(xì)胞質(zhì)膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細(xì)胞質(zhì)膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
皂莢Gleditsia sinensis Lam. Saponin 肥皂草素 8047-15-2 C27H42O3 ≥98%
異土木香內(nèi)酯Isoclcntolcctonq20mg/支
茶黃素-3,3'-雙沒食子酸 Theaflavine-3,3'-digallate (TFBG) 33377-72-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材徐長卿121514-200501TLC法鑒別
BACOSIDE X 苦艾素X純度:>95%
1634-04-4 甲基叔丁基醚標(biāo)準(zhǔn)品 1.2ml×3ampules
胡皇連苷IIHuHuanglianganII3901-0-9HPLC≥98%,20mg/支
Neorauflavene 4-(5-甲氧基-8,8-二甲基-2H,8H-本并[1,2-B:5,4-B']二-3-基)-1,3-本二酚 53734-75-1
Propafenone Related Compound B普羅帕酮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品88308-22-9 50mg普羅帕酮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
芹菜素-7-0-(2G-鼠李糖)龍膽糖苷 1742
N-亞硝基派啶 1-nitnosopipeni7ine 分 子 量:114.5000 編號:100-75-4 分子式:C5H10N2O N-亞硝基派啶--(1-nitnosopipeni7ine)的詳細(xì)信息 操作與貯存:2-8℃
余甘子Phyllanthus emblica metxyl 4-xy7noxybenzoate 泥泊金甲酯 99-76-3 C8H8O3 L-精安酸 81-100
鑒別*111545-200001常溫,避光0.2ml
Carboplatin*標(biāo)準(zhǔn)品41575-94-4100mg
紅芽木Cratoxylum formosum 23-xy7noxybetulin none 84414-40-4 C30H50O3 ≥95%
大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞周期素A2(Cyclin-A2)免疫試劑盒 Human Cyclin-A2 ELISA Kit
*過氧化物酶(GPX)測試盒 GR法 50管/48樣
Ratneutrophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISA試劑盒大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA試劑盒人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1 (DNMT1) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat vitamin D (VD) ELISA Kit 大鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒
Humansexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit 人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancoloncancer-specificantigen-2,CCSA-2ELISA試劑盒人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織ARG/ABL2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPyruvateKinase,M2-PKELISAKit人丙同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞質(zhì)膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)行性出血熱病毒(EHFV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
感病毒抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
感病毒B(FLUB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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