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更新時間:2017-07-04 14:19:30瀏覽次數(shù):171次
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植物組蛋白提取試劑盒50T使用說明書產(chǎn)品簡介:
植物組蛋白提取試劑盒提供了一種簡單而應用廣泛的方法以及相應的試劑提取組蛋白。適用于從各種植物細胞、組織樣本中提取組蛋白。提取過程簡單方便。組蛋白提取產(chǎn)物的產(chǎn)量大約0.2-0.4 mg 每107 個細胞或100 mg 組織,不同的細胞和組織中,產(chǎn)量差異很大。
植物組蛋白提取試劑盒50T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
植物組蛋白提取試劑盒50T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
白屈菜Greater Celandine Herb Sanguinarine 血根堿 5578-73-4 C20H14ClNO4 ≥95%
血根減Scnguincrinq20mg/支
茶黃素 Theaflavin 1011850 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定*100682-200401常溫,避光100mg
布林佐胺相關(guān)物質(zhì)B標準品404034-55-550mg
160972-33-8 *相關(guān)物質(zhì)B標準品(NA) 50mg
丹參 Salvia miltiorrhiza Bge. 隱丹參同 35825-57-1 C19H20O3 ≥98% 同咯酸安丁三醇:用于峰鑒別試驗(Y0000626
甲丙流靈標準品 甲菌定(二甲嘧酚 甲流危標準品
Polyetxylene Glycol 1000 聚乙二醇1000標準品25322-68-3 1g聚乙二醇1000標準品
升麻醇-3-O-β-D-木糖苷 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
刺五加苷E 39432-56-9 檢測用對照品 五加苷E
余甘子Phyllanthus emblica Momor-cerebroside I Momor-腦苷脂I 606125-07-9 C48H93NO10 靈溶液標準物質(zhì)061401
Diosbulbin B黃獨素B20086-06-0黃獨乙素;黃藥子素B20mg/支
*相關(guān)物質(zhì)A標準品91224-69-0 50mg
美蜂窩菌Hexagonia speciosa Furan-2-carboxylic acid 糠酸, 2-糠酸, 2-呋喃 88-14-2 C5H4O3 ≥95%
大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 ,英文名: GP-II ELISA Kit
人細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA檢測試劑盒HumanCyclin-D3ELISAKit 96T/48T
駱駝天*氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)免疫試劑盒 Camel Aspartate Aminotransferase,AST ELISA kit
CLIAKitforP-Selectin(HumanP-Selectin/CD62P/GMP140)ELISAkit人P選擇素規(guī)格:48T/96T
石蠟切片總游離*菲律賓(FILIPIN)熒光直接染色試劑盒50次
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humancollectinsub-familymember11,COLEC11ELISA試劑盒人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織Akt2/PKBβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanReceptorⅠfortheFcregionofimmunoglobulinA,FcαRⅠELISAKit*AFc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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