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更新時間:2017-07-04 14:18:31瀏覽次數(shù):137次
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產(chǎn)品簡介:
細胞膜蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種原代或傳代細胞樣本中提取膜蛋白,提取的膜蛋白純度高,不含核膜蛋白和胞漿蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內(nèi)完成。制備的膜蛋白保持天然活性,而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。
細胞膜蛋白提取試劑盒50T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞膜蛋白提取試劑盒50T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞膜蛋白提取試劑盒50T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
桑Morus alba Sanggenon N 5,5',7-三羥基-2'-甲基-2'-(4-甲基-3-戊烯基)-[2,6'-聯(lián)-2H-1-本并]-4(3H)-酮 92280-12-1 C25H26O6 ≥97%
蘆竹減LuZhujicnHPLC≥98%;20mg/支
卡枯醇 kakoul 18607-90-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材繡線菊(粉花繡線菊)121511-200401TLC法鑒別
BACOSINE 苦艾素純度:>95%
160337-95-1 *標(biāo)準(zhǔn)品(-20℃) 15mg
蒼術(shù)苷AAtractylosideA16024-77-120mg
Tiliroside 銀椴甙 20316-62-5
蟲磺 標(biāo)準(zhǔn)品 號:17606-31-4 100mg
2-金剛烷醇;2-Adamantanol 700-57-2 20mg 訂購|咨詢
*系統(tǒng)適用性混合物對照品標(biāo)準(zhǔn)品(2-8℃) 10mg
魚腥草Houttuynia cordata 海膽靈 1859-87-6 C29H39N3O2 ≥98% 牛胰島素(I0 05000
7491-09-0100mg
滲透直徑測定用*標(biāo)準(zhǔn)品126-07-8 2g
藏茄 Anisodus tanguticus [Syn. Scopolia tangutica]. Anisodamine 山莨菪堿 55869-99-3 C17H23NO4 ≥98%
小鼠補體成分4b(C4b)ELISA試劑盒 ,英文名: C4b ELISA Kit
人纖調(diào)蛋白(fibromodulin)ELISA檢測試劑盒HumanfibromodulinELISAKit 96T/48T
大鼠類風(fēng)濕因子(RF)免疫試劑盒 Rat Rheumatoid Factor,RF ELISA Kit
英文名稱RatAZISAKit大鼠*(AZT)規(guī)格:96T/48T
結(jié)晶紫細胞群落染色試劑盒250次
ELISAKitGAP-43人生長相關(guān)蛋白43規(guī)格:48T/96T
小鼠IgG Fc片段(IgGFcγ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
HumanThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 人血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCollagenaseTypeIIELISA試劑盒人膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織ABL1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanReceptorⅢfortheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅢELISAKit*GFc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞膜蛋白提取試劑盒50T免費代測人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人錨蛋白(ankyrin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人毛細血管擴張性共濟失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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