糖蛋白富集試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產品名稱：糖蛋白富集試劑盒100T實驗方法
產品簡介：

糖蛋白富集試劑盒可以選擇性的對糖蛋白和多肽進行富集和純化。本試劑盒可以用來提取富集哺乳動物細胞、組織、細菌、酵母、植物等樣本的的糖蛋白。 經本試劑盒制備的蛋白樣品可用于Western blotting, mass spectrometry, 2D-PAGE 和protein arrays等下游應用。

糖蛋白富集試劑盒100T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
糖蛋白富集試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
丹參 Salvia miltiorrhiza Bge. Salvianolic acid A 丹酚酸A 96574-01-5 C26H22O10 ≥98%

木香烴內酯Costunolidq20mg/支

補骨脂酚;破故紙酚 Backuchiol 10309-37-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定* 100674-200301常溫，避光100mg

殘留溶劑第1類標準品1.2ml×3ampules
156-54-7 丁酸鈉標準品 25mg

木通本醇苷BCalceolariosideB102471-98-220mg

5-xy7noxy-1,7-dipxenyl-6-hepten-3-one [R-(E)]-5-輕基-1,7-二本基-6-庚烯-3-同 87095-74-7

metxyl Caprylate 辛酸甲酯標準品111-11-5 300mg辛酸甲酯標準品

廣防風苷A;Epimeredinosid 20mg 訂購|咨詢
54643-79-7 *相關物質D標準品 25mg

魚子蘭Chloranthus elatior none 1372558-36-5 C15H18O5 ≥95% 硬酯酸甲酯C18(M1770200

二甲噻草安標準品 甜菜安標準品 丁迷脲標準品

可移植皮參考顯微照片標準品ea可移植皮參考顯微照片標準品

紫草清苷 63492-69-3 HPLC≥96%;20mg 訂購|咨詢
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